詳細介紹
人胚腎細胞(SV40T基因修飾);293T/17價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人胚腎細胞(SV40T基因修飾);293T/17價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 293細胞株插入SV40 T-抗原的溫度敏感基因后產生的高轉染效率的衍生株稱為293T。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優質胎牛血清,10%
傳代方法 消化5-15分鐘。1:4-1:8。3天內可長滿。
傳代情況 P(17+5)
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
細胞表面蛋白分離試劑盒 8次
細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V- 熒光素 594) 20 次
細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V- 熒光素 594) 50 次
細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-APC) 20 次
細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-APC) 50 次
細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-PE) 20 次
細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-PE) 50 次
細胞核蛋白提取試劑盒 50 次
細胞核微量制備試劑盒 50 次
細胞計數液 (Vi-CELL 儀 ) 100 次
細胞色素 C 100mg
細胞松弛素 B 1mg
細胞松弛素 B 溶液 ,20mg/mL 0.1mL
細胞周期與凋亡檢測試劑盒(PI 法) 50 次
細胞株系列 --
JWH 398 7-chloronaphthyl isomer (5 mg)(7-chloronaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone; JWH 398 7-chloronaphthyl isomer
JWH 210 6-ethylnaphthyl isomer (10 mg)(6-ethylnaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone; JWH 210 6-ethylnaphthyl isomer
bk-DMBDB (hydrochloride) (50 mg)1-(1,3-benzodioxol-5-yl)-2-(dimethylamino)-1-butanone, monohydrochloride; Dibutylone; bk-DMBDB (hydrochloride)
Arachidonic Acid methyl ester (250 mg)5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid, methyl ester; Methyl Arachidonate; Arachidonic Acid methyl ester
Eicosatetraynoic Acid (25 mg)5,8,11,14-eicosatetraynoic acid; ETYA; Eicosatetraynoic Acid
Oleoyl Ethanolamide (5 mg)N-(2-hydroxyethyl)-9Z-octadecenamide; OEA|Oleic Acid Ethanolamide; Oleoyl Ethanolamide
5(S),6(R)-Lipoxin A4 (250 ug)5S,6R,15S-trihydroxy-7E,9E,11Z,13E-eicosatetraenoic acid; 5(S),6(R),15(S)-TriHETE|5(S),6(R)-LXA4; 5(S),6(R)-Lipoxin A4
RCS-4 M11 metabolite (5 mg)5-(3-(4-hydroxybenzoyl)-1H-indol-1-yl)pentan-2-one; RCS-4 N-(4-oxo-pentyl)phenol metabolite; RCS-4 M11 metabolite
Clozapine (500 mg)8-chloro-11-(4-methyl-1-piperazinyl)-5H-dibenzo[b,e][1,4]diazepine; Azaleptin|HF 1854|Fazaclo|Iprox|Sizopin; Clozapine
IDE2 (5 mg)1-(2-cyclopentylidenehydrazide)-heptanedioic acid; IDE2
ML-265 (1 mg)6-
細菌 DNAout 250 次
細菌 DNAout 50 次
細菌 RNAout 100 次
細菌 RNAout 250 次
細菌蛋白酶抑制劑 10mL
細菌膜蛋白質微量提取試劑盒 50 次