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SV40T轉化人臍靜脈內皮細胞;PUMC-HUVEC-T1說明書

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  • 品牌 ATCC
  • 廠商性質 經銷商
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更新時間:2017-01-05 09:40:20瀏覽次數:420

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產品簡介

SV40T轉化人臍靜脈內皮細胞;PUMC-HUVEC-T1說明書采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。

詳細介紹

SV40T轉化人臍靜脈內皮細胞;PUMC-HUVEC-T1說明書現貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現貨,質量保證,公司所有產品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書

產品名稱SV40T轉化人臍靜脈內皮細胞;PUMC-HUVEC-T1說明書
用途僅用科研
保存條件4℃保存一年;-20℃長期保存

細胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  PUMC-HUVEC-T1形態(tài)呈現為典型的鵝卵石樣排列,已證明在體外可傳至40代。PUMC-HUVEC-T1內皮標記vWF、CD31、CD34均陽性,可結合凝集素,電鏡下可見緊密連接和W-P小體,Matrigle上可形成管型。不同代數的HUVEC-T1細胞核型正常穩(wěn)定(P12、P13、P19、P38),裸鼠體內接種不成瘤(P9和P33)。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS 40μU/L胰島素 + 40U/ml 肝素 + 1% NEAA
傳代方法  1:3~1:4傳代,一周1~2次
傳代情況 P12
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR  Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:11,13;D16S539:9,12;D18S51:16,17;D21S11:28,30;D2S1338:17,19;D3S1358:15,17;D5S818:11,13;D6S1043:11,14;D7S820:8,11;D8S1179:13,14;FGA:24;Penta E:15,17;vWA:14,16;
同工酶 
染色體  46,XX
使用權限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時內更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數據,用于證明細胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?br />操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。TdT 加尾法 DNA 生物素標記試劑盒    5次
TE 緩沖液,PH7.0    10mL
TE 緩沖液,PH7.5    10mL
TE 緩沖液,PH8.0    10mL
TE 緩沖液,PH8.5    10mL
TEV 蛋白酶    300U
Tfl DNA 聚合酶    100U
TG1 化學感受態(tài)細胞    0.1mL×10
TG1 菌種    1mL
TH1 菌種    1mL
Therminator DNA 聚合酶    200U
Therminator II DNA 聚合酶    100U
Therminator γ DNA 聚合酶    200UML-336 (10 mg)(E)-2-((1,4-dimethylpiperazin-2-ylidene)amino)-5-nitro-N-phenylbenzamide
6-EAPB (hydrochloride) (1 mg)6-(2-Ethylaminopropyl)Benzofuran; 1-(benzofuran-6-yl)-N-ethylpropan-2-amine, monohydrochloride
cis-Tramadol (hydrochloride) CRM (2 mL)CG 315|Contramal|NIH 10969|Tramal|Ultram|Zydol;
SureLight R-Phycoerythrin (R-PE) (1 mg)SureLight R-Phycoerythrin (R-PE)
生物素標記*基化組蛋白H3K4多肽Biotinylated Trimethyl Histone H3K4 Peptide (100 ul)
Z-VAD-FMK, Caspase-Family抑制劑(氟甲基酮)Caspase-Family Inhibitor Z-VAD-FMK
Z-VDVAD-FMK, Caspase-2抑制劑(氟甲基酮)Z-VDVAD-FMK
Aurora Kinase B抑制劑ADZ1152-HQPA
N-(3-Bromophenyl)-6,7-dimethoxy-4-quinazolinamine hydrochloride: AG 1517; NSC-669364; SU 5271PD 153035 Hydrochloride
23,27-Epoxy-3H-pyrido[2,1-c][1,4]oxaazacyclohentriacontine, AY 22989, SirolimusEZSolution Rapamycin
蛋白酶抑制劑套裝IV, EZBlockEZBlock Protease Inhibitor Cocktail IV
NChloroquine Diphosphate
5-Chloro-N-[4-(cyclohexylureidosulfonyl)phenethyl]-2-methoxybenzamide; Glyburide, N-p-[2-(5-Chloro-2-methoxybenzamido)ethyl]benzenesulfonyl-N’-cyclohexylureaGlibenclamide
3-[(1R)-1-(2,6-dichloro-3-fluorophenyl)ethoxy]-5-(1-piperidin-4-ylpyrazol-4-yl)pyridin-2-amineCrizotinib
Polyethylene glycol sorbitan monolaurate, Polyoxyethylenesorbitan monolaurateTween 20, MegaPure Detergent, 10% Solution
4-[4-(1,3-benzodioxol-5-yl)-5-pyridin-2-yl-1H-imidazol-2-yl]benzamideSB-431542
2-(2-propylpyridin-4-yl)-4-(p-tolyl)thiazoleFatostatin
5-[4-(4-Chlorobenzoyl)-1-piperazinyl]-8-nitroquinoline, CPNQSIRT2 Inhibitor, B2
chloro[[2,EUK-134
LR4 激活劑    2mL
Tma 核酸內切酶 III    500U
TMB 法地高雜交試劑盒    5次
TMB 法生物素雜交試劑盒    5次
TMRE    25mg
Tocopherol( 抗氧化劑 )    2g
*0 化學感受態(tài)細胞    0.1mL×10

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