人皮膚成纖維細(xì)胞；HSAS4圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人皮膚成纖維細(xì)胞；HSAS4圖片
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞系來源于一男性的皮膚組織。2005年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS
傳代方法  1：2傳代；3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR  Amelogenin：XY；D8S1179：11,13；D21S11：29,31；D7S820：10,11；CSF1PO：10,13；D3S1358：16；TH01： 9；D13S317：8，11；D16S539： 12；D2S1338：20,21；D19S433：13；vWA：14,18；THOX：8, 11；D18S51：15,17；D5S818：11, 12；FGA：21,24。
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

羥基脲    1g
羥脯氨酸測試盒 ( 消化法 )( 測培養(yǎng)細(xì)胞、培養(yǎng)液 )    48 T
羥脯氨酸測試盒( 堿水解法 )( 測動物血清、組織、尿液 )    48 T
親和層析柱    6 mL
親和層析柱    1 mL
親和層析柱    3 mL
親和層析柱    12 mL
親和層析柱    30 mL
親和層析柱    50 mL
親和硅烷     25mL
親和素    10mg
親和素    1mg
青鏈霉素溶液    100mL
青霉素 G 鉀鹽    1Mu
青霉素 G 鉀鹽溶液 ,200mg/mL    1 Mu
青霉素 G 鈉鹽    1g
青霉素 G 鈉鹽溶液    10mL
氫化可    5g
瓊脂粉    100g
瓊脂糖    100g
瓊脂糖    100g
瓊脂糖凝膠 2B    100mL
瓊脂糖凝膠 4B    100mL
秋水仙素    100mg
秋水仙素溶液    1mL
巰基磁珠     2mL5-hydroxy Tryptophol （5 mg）NSC 84416； 5-hydroxy-1H-indole-3-ethanol
Coenzyme A （25 mg）CoA； coenzyme A
NU 6027 （50 mg）6-（cyclohexylmethoxy）-5-nitroso-2,4-pyrimidinediamine
AWD 131-138 （10 mg）Imepitoin； 1-（4-chlorophenyl）-1,5-dihydro-4-（4-morpholinyl）-2H-imidazol-2-one
PBIT （5 mg）2-
β-Nicotyrine （1 mg）NSC 127943|NSC 407276|α-Nicotyrine； 3-（1-methyl-1H-pyrrol-2-yl）-pyridine
AB-CHMINACA metabolite M3A （500 ug）（1-（（4-hydroxycyclohexyl）methyl）-1H-indazole-3-carbonyl）-L-valine
GSK-LSD1 （hydrochloride） （10 mg）N-[（1R,2S）-2-phenylcyclopropyl]-4-piperidinamine, dihydrochloride
n-Dodecyl-β-D-maltoside （5 g）DDM|Dodecyl Maltoside； dodecyl 4-O-α-D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranoside
BIBR 1532omerase Inhibitor X； 2-[[（2E）-3-（2-naphthalenyl）-1-oxo-2-buten-1-yl]amino]-benzoic acid
Avagacestat （1 mg）BMS 708163； （2R）-2-[[（4-chlorophenyl）sulfonyl][[2-fluoro-4-（1,2,4-oxadiazol-3-yl）phenyl]methyl]amino]-5,5,5-trifluoro-pent*
OxolinicNSC 110364|Urinox； 5-ethyl-5,8-dihydro-8-oxo-1,3-dioxolo[4,5-g]quinoline-7-carboxylic acid
BRD73954 （5 mg）N1-hydroxy-N3-（2-phenylethyl）-1,3-benzenedicarboxamide
MCC-555 （1 mg）Isaglitazone|Netoglitazone|RWJ 241947； 5-[[6-[（2-fluorophenyl）methoxy]-2-naphthalenyl]methyl]-2,4-thiazolidinedione
曲拉通 X-100    100mL
曲拉通 X-114    100mL