詳細介紹
人胚肺二倍體細胞;HEL-1*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人胚肺二倍體細胞;HEL-1*現貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現貨,質量保證,公司所有產品僅供科研使用,不得用于醫學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
產品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來自一男性胎兒的正常肺組織,1986年由中國科學院昆明細胞庫建立。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養;若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
注意:*次植入后,在6-16小時內更換培養基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數據,用于證明細胞的真實性,并且幫助客戶更多的了解細胞特性。
凝血酶 1000U
牛膽粉 100g
牛膽酸鈉 25g
牛磺酸 5g
牛磺酸脫氧膽酸鈉 1g
牛甲狀腺素蛋白 10mg
牛肉蛋白胨 500g
牛血紅蛋白 5g
牛血清 γ 球蛋白標準品,2mg/mL 1mL
牛血清白蛋白 5g
牛血清白蛋白標準品,2mg/mL 1mL
牛血清白蛋白封堵液 250mL3-Bromomethcathinone (hydrochloride) (5 mg)1-(3-bromophenyl)-2-(methylamino)-1-propanone, monohydrochloride; 3-BMC; 3-Bromomethcathinone (hydrochloride)
5-MAPDB (hydrochloride) (5 mg)1-(2,3-dihydrobenzofuran-5-yl)-N-methylpropan-2-amine, monohydrochloride; 5-MAPDB (hydrochloride)
Naringenin (10 g)2S,3-dihydro-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4H-1-benzopyran-4-one; S-Dihydrogenistein|NSC 11855|NSC 34875|Salipurol; Naringenin
Magnolol (5 mg)5,5’-di-2-propen-1-yl-[1,1’-biphenyl]-2,2’-diol; NSC 293099; Magnolol
ADB-FUBINACA (1 mg)N-[1-(aminocarbonyl)-2,2-dimethylpropyl]-1-[(4-fluorophenyl)methyl]-1H-indazole-3-carboxamide; ADB-FUBINACA
JWH 081 N-pentanoic acid metabolite (10 mg)5-(3-(4-methoxy-1-naphthoyl)-1H-indol-1-yl)pentanoic acid; JWH 081 N-pentanoic acid metabolite
SIRT1/2 Inhibitor IV (10 mg)2,3-dihydro-5-[(2-hydroxy-1-naphthalenyl)methyl]-6-phenyl-2-thioxo-4(1H)-pyrimidinone; Cambinol|NSC 112546|SIRT1 Inhibitor II|SIRT2 Inhibitor VI; SIRT1/2 Inhibitor IV
Pseurotin A (5 mg)(5S)-8S-benzoyl-2-[1S,2S-dihydroxy-3Z-hexen-1-yl]-9R-hydroxy-8-methoxy-3-methyl-1-oxa-7-azaspiro[4。4]non-2-ene-4,6-dione; NSC 348694; Pseurotin A
Adenosine 5’-triphosphate (sodium salt) (25 g)adenosine 5’-(tetrahydrogen triphosphate), disodium salt; ATP|NSC 20268; Adenosine 5’-triphosphate (sodium salt)
L-AP4 (10 mg)2S-amino-4-phosphono-butanoic acid; L-(+)-2-amino-4-phosphorobutanoic acid|L-APB; L-AP4
Ro 25-6981 Maleate (10 mg)αR-(4-hydroxyphenyl)-βS-methyl-4-(phenylmethyl)-2Z-butenedioate-1-piperidinepropanol; Ro 25-6981 Maleate
牛胰島素 25mg
Okadaic acid 鉀鹽 (PP1 和 PP2A 抑制劑 ) 10μg
Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL 5μg
Oligo 快速復性液,10× 1mL
Oligo(dT) 纖維素 25mg
Oligo(dT) 再生溶液 100mL
OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受態細胞 0.1 mL×10
ONPG 干粉 1g
ONPG 溶液,10mg/mL 10mL