詳細(xì)介紹
人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以?xún)?nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。
人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)自14周齡男性胎兒的正常肺組織。由 Jacobs JP于1966年建立。
培養(yǎng)條件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 PN15
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR Amelogenin:XY;D8S1179:13;D21S11:31.2;D7S820:10,11;CSF1PO:11,12;D3S1358:15,17;TH01:8;D13S317:11, 14;D16S539:9, 11;D2S1338:20;D19S433:14,15;vWA:15;THOX:8;D18S51:15,21;D5S818:11, 12;FGA:21,23。
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
鳥(niǎo)嘌呤 5g
尿道上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子 5mL
尿苷 5g
尿苷 -5'- 二磷酸 25mg
尿嘧啶 5g
尿嘧啶 -DNA 糖基化酶 500U
尿嘧啶切刻酶 50U
尿嘧啶糖基化酶抑制劑 200U
尿素 100g
尿酸 25g
尿酸酶 100U
脲酶 ( 尿素酶 巨豆 ) 20Ku
鎳柱介質(zhì) 10mL
鎳柱介質(zhì) 2mL
檸檬酸 ( 無(wú)水 ) 100g
檸檬酸鈉,二水 100gJWH 398 8-chloronaphthyl isomer (10 mg)(8-chloronaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone; JWH 398 8-chloronaphthyl isomer
JWH 210 7-ethylnaphthyl isomer (1 mg)(7-ethyl-1-naphthalenyl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)-methanone; JWH 234; JWH 210 7-ethylnaphthyl isomer
2,3-Methylenedioxymethcathinone (hydrochloride) (10 mg)1-(benzo[d][1,3]dioxol-4-yl)-2-(methylamino)propan-1-one, monohydrochloride; 2,3-MDMC; 2,3-Methylenedioxymethcathinone (hydrochloride)
5,6-dehydro Arachidonic Acid (25 ug)8Z,11Z,14Z-eicosatrien-5-ynoic acid; 5,6-dehydro AA; 5,6-dehydro Arachidonic Acid
Eicosatetraynoic Acid (50 mg)5,8,11,14-eicosatetraynoic acid; ETYA; Eicosatetraynoic Acid
N-Oleoyl Glycine (10 mg)N-(9Z-octadecenoyl)-glycine; N-Oleoyl Glycine
5(S),6(R),15(R)-Lipoxin A4 (25 ug)5(S),6(R),15(R)-trihydroxy-7E,9E,11Z,13E-eicosatetraenoic acid; 5(S),6(R),15(R)-LXA4|AT-Lipoxin A4|15-epi Lipoxin A4; 5(S),6(R),15(R)-Lipoxin A4
Sumanirole Maleate (10 mg)5R,6-dihydro-5-(methylamino)-2Z-butenedioate-4H-imidazo[4,5,1-ij]quinolin-2(1H)-one; PNU 95666; Sumanirole Maleate
Etizolam (1 mg)4-(2-chlorophenyl)-2-ethyl-9-methyl-6H-thieno[3,2-f][1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]diazepine; AHR 3219|Depas|Y 7131; Etizolam
Entecavir (hydrate) (100 mg)2-ami,9-dihydro-9-[(1S,3R,4S)-4-hydroxy-3-(hydroxymethyl)-2-methylenecyclopentyl]-6H-purin-6-one, monohydrate; BMS 200475|Baraclude|SQ 34,676; Entecavir (hydrate)
ML-265 (25 mg)6-
凝固血液 DNAout 100 次
凝固血液 DNAout 30 次
凝膠法 miRNA 分離試劑盒 50 次
凝膠法內(nèi)毒素半定量試劑盒 10x0.1mL
凝血酶 1000U