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人正常主氣管上皮細(xì)胞;HNTEC/HL-013說(shuō)明書(shū)

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更新時(shí)間:2017-01-05 09:06:26瀏覽次數(shù):298

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

人正常主氣管上皮細(xì)胞;HNTEC/HL-013說(shuō)明書(shū)采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

詳細(xì)介紹

人正常主氣管上皮細(xì)胞;HNTEC/HL-013說(shuō)明書(shū)現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品名稱人正常主氣管上皮細(xì)胞;HNTEC/HL-013說(shuō)明書(shū)
用途僅用科研
保存條件4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開(kāi)。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定
運(yùn)輸保存:
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途:只可用于科研。
儲(chǔ)存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問(wèn)題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性,支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯(cuò)誤,全額退款。)公司針對(duì)每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
操作步驟:
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。MDS 42T7lac 菌種    1mL
MEM 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 )    500mL
MEM 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )    500mL
MEQ,(6- 甲氧 -N- 乙基喹啉碘 )    100mg
Metformin(LKB1-AMPK 激活劑 )    1g
Methacarn 固定液    250 mL
MG-132(Proteasome 抑制劑 )    1mg
MG1655 菌種    1mL
MgCl2溶液,25mM,PCR     5mL
MgSO4溶液,10mM,PCR     5mL
miRNA cDNA *鏈合成試劑盒    25 次
miRNA PAGE 膠回收試劑盒    40 次
miRNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)    30 次
miRNA 尿素 -PAGE 上樣液 ,6×    1.5mL過(guò)濾水(6X500ML)Purified Water, 18 mega-ohm, purified water. Cell culture tested. Sterile Filtered
AFC[7-氨基-4-三氟甲基香豆素] 可標(biāo)記多肽AFC [7-Amino-4-trifluoromethylcoumarin] Validated for labeling peptides
5(6)-ROX[5(6)-羧基-X-羅丹明] 混合物5(6)-ROX [5-(and 6)-Carboxy-X-rhodamine] Mixed isomers
TQ3 琥珀酰亞胺酯Tide Quencher 3 succinimidyl ester [TQ3 SE]
TF3標(biāo)記的Asp天冬氨酸FMOC-Asp(TF3)-OH
20S蛋白酶體冷光底物Suc-LLVY-D-AminoluciferinSuc-LLVY-D-Aminoluciferin
丙磺舒 細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)Probenecid Cell culture tested
氯離子熒光探針MEQ[6-甲氧基-N-乙基喹啉碘]MEQ [6-Methoxy-N-ethylquinolinium iodide]
4’,6二脒基-2-苯吲哚鹽酸DAPI Dilactate
鬼筆環(huán)肽 胺Phalloidin Amine
鬼筆環(huán)肽-iFluor 647偶聯(lián)物Phalloidin-iFluor 647 Conjugate
Cyanine 3。5, 單琥珀酰亞胺脂 [相當(dāng)于Cy3。5 NHS脂]Cyanine 3。5, monosuccinimidyl ester [equivalent to Cy3。5 NHS ester]
熒光底物BOC-Val-Pro-Arg-AminoluciferinBOC-Val-Pro-Arg-Aminoluciferin
Cal-520 NHS EsterCal-520 NHS Ester
2C-T-4 (hydrochloride) (5 mg)2,5-dimethoxy-4-[(1-methylethyl)thio]-benzeneethanamine, monohydrochloride; 2,5-dimethoxy-4-isopropylthiophenethylamine; 2C-T-4 (hydrochloride)
Prostaglandin D1 (5 mg)9。alpha。,15S-dihydroxy-11-oxo-prost-13E-en-1-oic acid; PGD1; Prostaglandin D1
Canertinib (hydrochloride) (50 mg)N-[4-[(3-chloro-4-fluorophenyl)amino]-7-[3-(4-morpholinyl)propoxy]-6-quinazolinyl]-2-propenamide, dihydrochloride; CI 1033|PD 183805; Canertinib (hydrochloride)
2-methyl Benzamideoxime (5 g)(Z)-N’-hydroxy-2-methylbenzimidamide; 2-methyl Benzamideoxime
2-(4-Pyridyl)-4-methyl-thiazole-5-Carboxylic Acid (500 mg)4-methyl-2-(4-pyridinyl)-5-thiazolecarboxylic acid; 2-(4-Pyridyl)-4-methyl-thiazole-5-Carboxylic Acid
miRNA 尿素 -PAGE 上樣液 ,6×    10mL
miRNA 熒光定量檢測(cè)試劑盒    25 次
Mito-Tracker Green( 粒體綠色熒光探針 )    50μL
Mlu    1000U
MM1-43(FM?1-43)    1mg
MM4-64(FM?4-64)    1mg
MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶    10000U

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