詳細介紹
人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系衍生自WI-38細胞。WI-38細胞感染低滴度的SV40病毒,經過連續傳代、克隆選擇獲得多株亞系,其中2RA亞系含有SV40 neo (T)和轉移抗原,從而改變其有限細胞系的特性,可在常規條件下連續傳代。該細胞系的實驗操作甚少在生物安全P2級條件下進行。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C265
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
谷胱甘肽過氧化物酶檢測試劑盒 100 次
谷胱甘肽還原酶檢測試劑盒 100 次
谷胱甘肽瓊脂糖 2mL
谷胱甘肽一還原酶測試盒 50 T
骨骼肌細胞生長因子 5mL
鈷柱介質 10mL
固藍 BB 鹽 5g
固藍 RR 鹽 5g
固綠 5g
固相 RNase 清除劑 100mL
固相 RNase 清除劑 250mL
固相內毒素清除劑 100g
固相內毒素清除劑 500g
硅基磁珠 2mL
硅膠膜 DNA 離心吸附柱 ( 大提 ) 1套
硅膠膜離心吸附柱 ( 大提 ) 收集管 1只
硅膠膜離心吸附柱 ( 小提 ) 收集管 50 只
硅膠膜離心吸附柱系列 ( 小提 ) 50 套
硅膠膜離心吸附柱再生液 500 次
鮭魚精 DNA 100mg5-fluoro SDB-005 (1 mg)naphthalen-1-yl 1-(5-fluoropentyl)-1H-indazole-3-carboxylate
ML-60218 (5 mg)2-chloro-N-[3-(5-chloro-3-methylbenzo[b]thien-2-yl)-1-methyl-1H-pyrazol-5-yl]-benzenesulfonamide
Lamotrigine (10 mg)BW 430C|Epilepax|LTG|Lamictal; 6-
Zidovudine (100 mg)AZT|Azidothymidine|NSC 602670|Retrovir|ZDV; 3’-
Diclazepam (5 mg)2’-Chlorodiazepam|Ro 5-3448; 7-chloro-5-(2-chlorophenyl)-1,3-dihydro-1-methyl-2H-1,4-benzodiazepin-2-one
Conoidin A (50 mg)2,3-bis(bromomethyl)-quinoxaline 1,4-dioxide
2C-T-2 (hydrochloride) (exempt preparation) (1 mg)2,5-Dimethoxy-4-ethylthiophenethylamine; 4-(ethylthio)-2,5-dimethoxy-benzeneethanamine, monohydrochloride
Ivabradine (hydrochloride) (50 mg)S 16257; 3-[3-[[[(7S)-3,4-dimethoxybicyclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-yl]methyl]methylamino]propyl]-1,3,4,5-tetrahydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one, monohydrochloride
Edrophonium (chloride) (250 mg)Enlon|Tensilon; N-ethyl-3-hydroxy-N,N-dimethyl-benzenaminium, monochloride
MF498 (25 mg)N-[[[4-(5,9-diethoxy-6,8-dihydro-6-oxo-7H-pyrrolo[3,4-g]quinolin-7-yl)-3-methylphenyl]methyl]sulfonyl]-2-methoxy-benzeneacetamide
Zalcitabine (500 mg)2’,3’-Dideoxycytidine|Hivid|NSC 606170|Ro 24-2027/000|ddC; 2’,3’-dideoxy-cytidine
Cefpodoxime (free acid) (100 mg)R 3763; (6R)-7R-[[(2Z)-2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-(methoxyimino)acetyl]amino]-3-(methoxymethyl)-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid
N-Acetyl-4-benzoquinone imine (5 mg)N-Acetyl-p-benzoquinonimine|NAPQI; N-(4-oxo-2,5-cyclohexadien-1-ylidene)-acetamide
鮭魚精 DNA 溶液 1mL
果膠 25g
果膠酶 100mg
果膠酶 Y-23 100mg
過硫酸銨 25g