詳細介紹
血管平滑肌細胞;T/G HA-VSMC*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
血管平滑肌細胞;T/G HA-VSMC*現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 T/G HA-VSMC細胞建系于1992年(Tilberg A F,et al)。該細胞系屬有限細胞系,可因連續(xù)傳代而衰老死亡。連續(xù)傳代試驗顯示,T/G HA-VSMC細胞經(jīng)歷15-20個群體倍增時間就會衰老死亡,固需控制有限的傳代次數(shù)。
培養(yǎng)條件 F12K 10%FBS;加多種生長因子,詳見參考文獻
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C15
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權限 A類運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細胞復蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?/p>
Genistein( 酪氨酸蛋白激酶抑制劑 ) 25mg
Glucosamine( 胰島素抵抗誘導劑 ) 5g
Golgi-Tracker Red( 高爾基體紅色熒光探針 ) 1mg
GpC 甲基轉(zhuǎn)移酶 (M.CviPI) 200U
GS115 酵母菌種 1mL
GS190 酵母菌種 1mL
GS200 酵母菌種 1mL
GSH 和 GSSG 試劑盒 共 100 次
GSH 試劑盒 ( 谷胱甘肽測試盒 )( 比色法 ) 50 T
GSH( 抗氧化劑 ) 1g
GSH—PX 測試盒 50 T
GSH—ST 測試盒 100 T
GST 固定試劑盒 1套
GTP 溶液,100mM 0.25mL
GTP 溶液,2.5mM 2mL
GV3101 農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞 10×100μL
1,2-Diarachidoyl-sn-glycero-3-PC (100 mg)1,2-diarachidoyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine; 1,2-DAPC|L-α-Diarachidonoyl lecithin|1,2-Diarachidoyl-sn-glycero-3-phosphocholine; 1,2-Diarachidoyl-sn-glycero-3-PC
α-NETA (25 mg)N,N,N-trimethyl-γ-oxo-2-naphthalenepropanaminium, monoiodide; α-NETA
ML-191 (10 mg)5-phenyl-3-(1-(1-(p-tolyl)cyclopropane-1-carbonyl)piperidin-4-yl)-1,3,4-oxadiazol-2(3H)-one; CCG-152883|CID-23612552; ML-191
Epalrestat (10 mg)5Z-[(2E)-2-methyl-3-phenyl-2-propen-1-ylidene]-4-oxo-2-thioxo-3-thiazolidineacetic acid; Kinedak|ONO-2235|Sorbistat; Epalrestat
Fluprostenol-d4 (50 ug)9α,11α,15R-trihydroxy-16-(3-(trifluoromethyl)phenoxy)-17,18,19,20-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic-3,3,4,4-d4 acid; 16-m-trifluoromethylphenoxy tetranor Prostaglandin F2α-d4; Fluprostenol-d4
(S)-(-)-1,1’-Bi-2-naphthol (500 mg)(S)-[1,1’-binaphthalene]-2,2’-diol; (S)-BINOL; (S)-(-)-1,1’-Bi-2-naphthol
CP 47,497-C9-homolog (10 mg)cis-5-(1,1-dimethylnonyl)-2-(3-hydroxycyclohexyl)-phenol; CP 47,497-C9-homolog
α-Linolenoyl Ethanolamide-d4 (500 ug)N-(2-hydroxyethyl-1,1’,2,2’-d4)-octadeca-9Z,12Z,15Z-trienamide; α-Linolenoyl Ethanolamide-d4
Topiramate (50 mg)2,3:4,5-bis-O-(1-methylethylidene)-β-D-fructopyranose 1-sulfamate; Topamax |TPM|Epitomax|McN 4853|RWJ 17021; Topiramate
GV3101 農(nóng)桿菌菌種 1mL
改良 Lowry 法蛋白定量試劑盒 1000 次
鈣蛋白酶抑制劑Ⅰ溶液,10mg/mL 10mL
鈣蛋白酶抑制劑Ⅱ溶液,10mg/mL 10mL
鈣離子載體 1mg
鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶測試盒 24 T