詳細介紹
人羊膜細胞;WISH價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人羊膜細胞;WISH價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 zui初以為這株細胞的起源是正常羊膜,但隨后通過同工酶分析、HeLa標記染色體和DNA指紋法分析,證實該細胞是HeLa細胞污染的;角蛋白陽性。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C187
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
分枝桿菌 RNAout 50 次
分子生物學糖原干粉 1.0g
分子生物學糖原溶液,10mg/mL 1mL
分子雜交爐 1臺
吩硫酸甲酯 1g
酚 - 氯 - 異戊混合液 (DNA 提取 ) 100mL
酚 - 氯 - 異戊混合液 (RNA 提取 ) 100mL
酚 - 氯混合液 (DNA 提取 ) 100mL
酚 - 氯混合液 (RNA 提取 ) 100mL
糞便 DNAout 100 次
糞便 DNAout 30 次
弗氏不*佐劑 10mL
弗氏*佐劑 10mL
氟 25g
福林酚試劑 100mLCiticoline (sodium salt) (500 mg)P’-[2-(trimethylammonio)ethyl] ester-cytidine 5’-(trihydrogen diphosphate)-inner, monosodium salt; Cytidine 5’-diphosphocholine|Flussorex|Gerolin|Logan|Neurotron|Sinkron; Citicoline (sodium salt)
JWH 019 N-(5-hydroxyhexyl) metabolite-d5 (1 mg)(1-(5-hydroxyhexyl)-1H-indol-3-yl-2,4,5,6,7-d5)(naphthalen-1-yl)methanone; JWH 019 N-(5-hydroxyhexyl) metabolite-d5
Cysmethynil (10 mg)5-(3-methylphenyl)-1-octyl-1H-indole-3-acetamide; Icmt Inhibitor; Cysmethynil
Clomifene (10 g)2-[4-(2-chloro-1,2-diphenylethenyl)phenoxy]-N,N-diethyl-ethanamine; Clomiphene B; Clomifene
Aprepitant (5 mg)5-[[(2R,3S)-2-[(1R)-1-[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl]ethoxy]-3-(4-fluorophenyl)-4-morpholinyl]methyl]-1,2-dihydro-3H-1,2,4-triazol-3-one; Emend|L-754,030|MK 869|ONO-7436; Aprepitant
MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC (5 mg)N-(4-methoxy-1,4-dioxobutyl)-L-alanyl-L-alanyl-L-prolyl-N-(4-methyl-2-oxo-2H-1-benzopyran-7-yl)-L-valinamide; I 1270|MeOSuc-AAPV-AMC|Methoxy Succinyl-Ala-Ala-Pro-Val-AMC; MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC
FDU-PB-22 (10 mg)naphthalen-1-yl 1-(4-fluorobenzyl)-1H-indole-3-carboxylate; FDU-PB-22
β-Lapachone (50 mg)3,4-dihydro-2,2-dimethyl-2H-naphtho[1,2-b]pyran-5,6-dione; NSC 26326|SL 11001|ARQ 501|NSC 629749; β-Lapachone
ADB-PINACA pentanoic acid metabolite (10 mg)5-(3-((1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl)carbamoyl)-1H-indazol-1-yl)pentanoic acid; ADB-PINACA pentanoic acid metabolite
腐胺 5g
G(5′)ppp(5′)A 帽結構類似物 25 OD
G(5′)ppp(5′)G 帽結構類似物 25 OD
GAL 指示劑培養基 100mL
GAPDH 小鼠單抗 1000μL
GAPDH 小鼠單抗 30μL