詳細介紹
人臍靜脈細胞融合細胞;EA.hy926說明書現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | 人臍靜脈細胞融合細胞;EA.hy926說明書 |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱
形態(tài)特性 內(nèi)皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 在PEG脅迫下,將原代培養(yǎng)的人臍靜脈細胞與抗硫鳥嘌呤的A549克隆株融合,構(gòu)建了人臍靜脈細胞株, EA.hy926。 融合子在HAT培養(yǎng)基上生長并以八因子相關抗原篩選。 EA.hy926已經(jīng)過100次以上的群體倍增(PDLs)。 電鏡照片顯示W(wǎng)eibel-Palade小體的細胞質(zhì)分布以及組織特異性的細胞器,分化的內(nèi)皮細胞特性如血管生成,體內(nèi)平衡/血栓形成,血壓及炎癥反應。 [PubMed: 6407019] [PubMed: 2079463]
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細胞復蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?br />操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。動植物膜蛋白微量制備試劑盒 50 次
動植物總蛋白微量提取試劑盒 50 次
杜氏 PBS 緩沖液 ,10× 100mL
端粒酶重復片段擴增試劑盒 (TRAP) 50 次
對氨基苯磺酸 25g
對苯醌固定液 250 mL
對硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷 1g
對硝基苯磷酸二鈉鹽 1g
多點突變試劑盒 20 次
多酚氧化酶 ( 菌菇 ) 25KU
多核苷酸磷酸化酶 100mg
多聚 -L- 賴氨酸 (15-30 萬 ) 25mg
多聚 -L- 賴氨酸 (3-7 萬 ) 25mg
多聚 -L- 賴氨酸 (7-15 萬 ) 25mg
多聚半乳糖醛酸鈉鹽 1g16,16-dimethyl-6-keto Prostaglandin E1 (100 mg)6,9-dioxo-11。alpha。,15R-dihydroxy-16,16-dimethyl-prost-13E-en-1-oic acid; 16,16-dimethyl-6-keto PGE1; 16,16-dimethyl-6-keto Prostaglandin E1
19(R)-hydroxy Prostaglandin E1 (50 ug)9-oxo-11。alpha。,15S,19R-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 19(R)-hydroxy PGE1; 19(R)-hydroxy Prostaglandin E1
Iberin (1 mg)1-isothiocyanato-3-(methylsulfinyl)-propane; NSC 321801; Iberin
Sulprostone (1 mg)N-(methylsulfonyl)-9-oxo-11。alpha。,15R-dihydroxy-16-phenoxy-17,18,19,20-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-amide; Sulprostone
13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin F1α (500 ug)9。alpha。,11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-prostan-1-oic acid; 13,14-dihydro-15-keto PGF1α; 13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin F1α
iPF2α-IV (50 ug)5(S),9。alpha。,11。alpha。-trihydroxy-1。alpha。,1。beta。,1。gamma。-trihomo-18,19,20-trinor-8。beta。-prosta-2Z,6E-dien-1-oic acid; iPF2α-IV
13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin F2α isopropyl ester (10 mg)9。alpha。,11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-prost-5Z-en-1-oic acid, isopropyl ester; 13,14-dihydro-15-keto PGF2α isopropyl ester; 13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin F2α isopropyl ester
15(S)-Fluprostenol (100 mg)9α,11α,15S-trihydroxy-16-(3-(trifluoromethyl)phenoxy)-17,18,19,20-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15(S)-Fluprostenol
15(R),19(R)-hydroxy Prostaglandin F2α (50 ug)9α,11α,15R,19R-tetrahydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15(R),19(R)-hydroxy PGF2α; 15(R),19(R)-hydroxy Prostaglandin F2α
Prostaglandin J2 (1 mg)11-oxo-15S-hydroxy-prosta-5Z,9,13E-trien-1-oic acid; PGJ2; Prostaglandin J2
Leukotriene B4 (25 ug)5S,12R-dihydroxy-6Z,8E,10E,14Z-eicosatetraenoic acid; LTB4; Leukotriene B4
6-keto Prostaglandin F1α-d4 (1 mg)6-oxo-9α,11α,15S-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic-3,3,4,4-d4 acid; 6-keto PGF1α-d4; 6-keto Prostaglandin F1α-d4
多聚甲醛 25g
多聚甲醛 - 磷酸緩沖固定液 250 mL
多聚甲醛 - 氫氧固定液 250 mL
多粘菌素 B 硫酸鹽 5mL