詳細介紹
人正常肺上皮細胞;BEAS-2B價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人正常肺上皮細胞;BEAS-2B價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 從一位非癌個體的正常人支氣管上皮病理切片分離出上皮細胞。 這些細胞用腺病毒12-SV40病毒雜交病毒感染并克隆。 DEAS-2B細胞保留了對血清反應進行鱗關分化的能力,并有用于篩選誘導或影響分化及致癌的化學或生物制劑。 細胞角蛋白及SV40抗原染色陽性。
培養條件
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 P(39+5)
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
DNA 上樣液 ( 藍 ),6× 10mL
DNA 上樣液 ( 藍 ),6×( 非甘油 ) 10mL
DNA 探針變性液 10mL
DNA 拓撲異構酶 I 100U
DNA 稀釋液 10mL
DNA 洗脫液 10mL
DNA 洗脫液 50mL
DNA 洗脫液 2.0 10mL
DNA 修復混合液 150 次
DNA 修復混合液 30 次
DNA 樣品采樣拭子 50 支
DNA 粘轉平試劑盒 20 次
DNase I 干粉 100mg
DNase I 溶液 1.5mL
dNTP 和引物清除劑 100 次
dNTP 溶液 ( 標記 ) 0.5mL
dNTP 溶液 ,10mM 0.5mL
dNTP 溶液 ,10mM 5mLEdrophonium (chloride) (500 mg)Enlon|Tensilon; N-ethyl-3-hydroxy-N,N-dimethyl-benzenaminium, monochloride
MF498 (5 mg)N-[[[4-(5,9-diethoxy-6,8-dihydro-6-oxo-7H-pyrrolo[3,4-g]quinolin-7-yl)-3-methylphenyl]methyl]sulfonyl]-2-methoxy-benzeneacetamide
N-Ethylpentylone (hydrochloride) (10 mg)1-(1,3-benzodioxol-5-yl)-2-(ethylamino)-1-pentanone, monohydrochloride
Cefpodoxime (free acid) (25 mg)R 3763; (6R)-7R-[[(2Z)-2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-(methoxyimino)acetyl]amino]-3-(methoxymethyl)-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid
N-Acetyl-4-benzoquinone imine (500 ug)N-Acetyl-p-benzoquinonimine|NAPQI; N-(4-oxo-2,5-cyclohexadien-1-ylidene)-acetamide
1-Oxyl-2,2,5,5-tetramethylpyrroline-3-carboxylate NHS ester (5 mg)1-Oxyl-2,2,5,5-tetramethylpyrroline-3-carboxylate N-hydroxysuccinimide ester|NSC 319633|OXYL-1-NHS|Tempyo Ester; 3-
WHI-P154 (5 mg)JAK3 Inhibitor II|Janus-Associated Kinase 3 Inhibitor II; 2-bromo-4-[(6,7-dimethoxy-4-quinazolinyl)amino]-phenol
AWD 131-138 (50 mg)Imepitoin; 1-(4-chlorophenyl)-1,5-dihydro-4-(4-morpholinyl)-2H-imidazol-2-one
PD 0332991 (25 mg)Palbociclib; 6-
dNTP 溶液,100mM 0.5mL
dNTP 溶液,100mM 5mL
dNTP 溶液,2.5mM 0.5mL
dNTP 溶液,2.5mM 5mL
DOP-PCR 試劑盒 50 次
Doxorubicin(Adriamycin) 阿霉素 100μL