詳細介紹
人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2圖片質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2圖片操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態特性 梭形
生長特性 貼壁生長
特征特性 取材自引產的11周男性胚胎組織,中國醫學科學院基礎醫學研究所細胞資源中心建立。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 P3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:9,11;D16S539:11,13;D18S51:12,13;D19S433:13,14;D21S11:29;D2S1338:17,23;D3S1358:16;D5S818:9,11;D7S820:10,12;D8S1179:10,13;FGA:21,25;TH01:7,9;TPOX:8,11;vWA:14,16; 同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
MB Substrate Solution (12 ml)TMB Substrate Solution
Anti-Human IgG4 Precoated 96-Well Strip Plate (1 ea)Anti-Human IgG4 Precoated 96-Well Strip Plate
Thromboxane B2 EIA Antiserum (500 dtn)Thromboxane B2 EIA Antiserum
JWH Metabolite ELISA Negative Control (1 ea)JWH Metabolite ELISA Negative Control
13(S)-HpODE (50 ug)13S-hydroperoxy-9Z,11E-octadecadienoic acid; 13(S)-HpODE
Tris-HCl Stock Solution (1 M, pH 8。0) (1 L)Tris-HCl Stock Solution (1 M, pH 8。0)
Cell-Based Annexin V FITC (50 uL)Cell-Based Annexin V FITC
Arachidonoyl PAF C-16 (5 mg)1-O-hexadecyl-2-O-(5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoyl)-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; 1-O-hexadecyl-2-Arachidonoyl-sn-glycero-3-Phosphocholine; Arachidonoyl PAF C-16
Palmitoyl Serinol (100 mg)N-[2-hydroxy-1-(hydroxymethyl)ethyl]-hexadec*; Palmitoyl Serinol
1-Palmitoyl-2-oleoyl-3-linoleoyl-rac-glycerol (100 mg)3-[(1-oxohexadecyl)oxy]-2-[[(9Z)-1-oxo-9-octadecenyl]oxy]-9Z,12Z-octadecadienoic acid propyl ester; POL; 1-Palmitoyl-2-oleoyl-3-linoleoyl-rac-glycerol
Fluorometric Thiol Detector (300 ul)Fluorometric Thiol Detector
SIRT6 (human recombinant) Direct Assay Reagent (1 ea)SIRT6 (human recombinant); SIRT6 (human recombinant) Direct Assay Reagent大腸菌群顯色培養基/Coliform Chromogenic Medium快速準確檢測大腸菌群,大腸菌群培養24小時,顯蘭色1升國產/進口
貓腎上細胞英文名稱:CRFK
酪蛋白瓊脂/水解酪蛋白瓊脂/Casein Agar Medium用于鑒別蠟樣芽孢桿菌分解酪蛋白試驗250克國產/進口
大鼠腎管狀上細胞*培養基100mL
糖蛋白胨培養液/糖蛋白胨肉湯/Lactose Peptone Broth飲用水中總大腸菌群多管發酵法檢驗250克國產/進口
UMR-106(大鼠骨肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2
乙基紫疊氮鈉肉湯/EVA肉湯/EVA Broth用于鏈球菌的增菌培養250克國產/進口
RN-c, 大鼠質神經元
HPAC(人胰腺腺泡上)5×106cells/瓶×2
NCI-H23(人非小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
人直腸平滑肌細胞*培養基100mL
中國藍薔薇酸瓊脂250克國產/進口
Ca Ski(人宮頸上細胞)5×106cells/瓶×2
G1(發綠色熒光的小鼠胚胎干細胞)5×106cells/瓶×2
MuM-2B(人眼脈絡黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2gersion
RWPE1(人前列腺上細胞)5×106cells/瓶×2
IMR-32(人神經母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
CoC1/DDP(人卵巢耐藥細胞亞株)5×106cells/瓶×2
G1(發綠色熒光的小鼠胚胎干細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞英文名稱:DCS
Pyruvate Assay Buffer (10X) (10 ml)Pyruvate Assay Buffer (10X)
Malate Fluorometric Cofactor (1。5 mg)Malate Fluorometric Cofactor
GR Glutathione Reductase (control) (1 ea)GR Glutathione Reductase (control)
Hydrogen Peroxide Assay (urinary) Reagent 2 (1 ea)Reagent 2; Hydrogen Peroxide Assay (urinary) Reagent 2