詳細(xì)介紹
人胚肝二倍體細(xì)胞;CCC-HEL-1圖片質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人胚肝二倍體細(xì)胞;CCC-HEL-1圖片操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 取材自引產(chǎn)的15周胚胎組織,中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 P6
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12;D13S317:8;D16S539:12;D18S51:13,20;D6S1043:12,18;D21S11:29,32.2;D2S1338:19,20,;D3S1358:14,15;D5S818:12,13;D7S820:10;D8S1179:13,14;FGA:21,23;Penta E:14,16;vWA:16;
同工酶
染色體 46,XY
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
--)-Methylenedioxy Pyrovalerone (5 mg)(-)-MDPV, --)-Methylenedioxy Pyrovalerone, 1-(benzo[d][1,3]dioxol-5-yl)-2-(pyrrolidin-1-yl)pentan-1-one
11-dehydro Thromboxane B2 (250 ug)11-keto TXB2|11-dehydro TXB2, 11-dehydro Thromboxane B2, 9α,15S-dihydroxy-11-oxothromba-5Z,13E-dien-1-oic acid
Corey PG-Lactone Diol (10 g)Corey PG-Lactone Diol, (3aR,4R,5R,6aS)-hexahydro-5-hydroxy-4-[(1E,3S)-3-hydroxy-1-octenyl]-2H-cyclopenta[b]furan-2-one
(S)-(+)-Eicosapentaenyl-2 -Hydroxy-1 -Propylamide (10 mg)(S)-(+)-Eicosapentaenyl-2 -Hydroxy-1 -Propylamide, N-((S)-1-hydroxypropan-2-yl)icosa-5Z,8Z,11Z,14Z,17Z-pentaenamide
兩性霉素B(1GM)Amphotericin B , CAS 1397-89-3; MW 924.08; ≥800ug/mg; USP
赤霉素(溶液)(100ML)Gibberellic Acid (GA3) Solution, 1 mg/ml in H2O. Sterile Filtered
肌醇(10KG)myo-Inositol, CAS# 87-89-8; ≥99%
磷酸氫二鈉七水合物(1KG)Sodium Phosphate, Dibasic, Heptahydrate, ACS Grade; Cas# 7782-85-6; Formula: Na2HPO4
D--麥芽糖一水合物(25KG)D-Maltose, Monohydrate, CAS# 6363-53-7; MW 360.6
磺酰羅丹明B 熒光參照標(biāo)準(zhǔn)Sulforhodamine B Fluorescence reference standard
6-TRITC; R 異構(gòu)體 [四甲基羅丹明-5-異硫氰酸]6-TRITC; R isomer [Tetramethylrhodamine-6-isothiocyanate]
TF3 酸 的Cy3替代品Tide Fluor 3 acid [TF3 acid] Superior replacement to Cy3
EDANS標(biāo)記的Lys賴氨酸FMOC-Lys(DABCYL)-OH
MMP Red紅色熒光底物MMP Red substrate雞胚成纖維細(xì)胞英文名稱:DCE
卵磷脂(蛋黃)/蛋黃軟磷脂/磷脂酰膽堿/蛋黃卵磷脂/磷脂蛋黃素/Lecithin from egg yolkBR10克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
HCT-15(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
改良沙氏瓊脂培養(yǎng)基/Sabouraud′s Agar,Modified真菌檢測(cè)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
NCI-H1650(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
錳營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基/Manganese Nutrient Agar Medium250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
胃蛋白胨BR250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
SW480(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
RT4(人膀胱移行細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Poly-D-lysine溶液規(guī)格:2mggersion
Y3-Ag 1.2.3(大鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞gersion
NRK(大鼠腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HSC-T6(大鼠肝星形細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
BRL(大鼠肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
EBTr (NBL-4) (牛胚氣管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腺英文名稱:EMT-6
Ana-1(小鼠巨噬細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
EGTA,四鈉鹽 超級(jí)純EGTA tetrasodium salt UltraPure Grade
膜電位熒光探針DiSBAC2(3)DiSBAC2(3) [Bis-(1,3-diethylthiobarbituric acid)trimethine oxonol]
iFluor 532琥珀酰SEiFluor 532 succinimidyl ester
Resorufin beta-D-galactopyranosideResorufin beta-D-galactopyranoside