詳細介紹
人胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF價格【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF價格
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 北京眼科研究所建系。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 P5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:10,11;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:13,14;D21S11:31,32.2;D2S1338:18,19;D3S1358:15;D5S818:10,12;D7S820:11;D8S1179:10,16;FGA:18,22;TH01:7,10;TPOX:8;vWA:14;
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
Arachidonic Acid-d11 (100 ug)AA-d11; 5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic-16,16,17,17,18,18,19,19,20,20,20-d11 acid
Corilagin (10 mg)cyclic 3,6-[(1R)-4,4’,5,5’,6,6’-hexahydroxy[1,1’-biphenyl]-2,2’-dicarboxylate] 1-(3,4,5-trihydroxybenzoate)-β-D-glucopyranose
Bakuchiol (5 mg)(S)-(+)-Bakuchiol; 4-[(1E,3S)-3-ethenyl-3,7-dimethyl-1,6-octadien-1-yl]-phenol
(±)12-HEPE (100 ug)(±)-12-hydroxy-5Z,8Z,10E,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid; (±)12-HEPE
(±)15-HETE (100 ug)(±)15-hydroxy-5Z,8Z,11Z,13E-eicosatetraenoic acid; (±)15-HETE
(±)-Jasmonic Acid methyl ester (25 g)3-oxo-2-(2-penten-1-yl)-cyclopentaneacetic acid, methyl ester; (±)-Methyl Jasmonate; (±)-Jasmonic Acid methyl ester
Sitagliptin (phosphate) (250 mg)INN|MK 431|ONO-5435; (3R)-3-ami-[5,6-dihydro-3-(trifluoromethyl)-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyrazin-7(8H)-yl]-4-(2,4,5-trifluorophenyl)-1-butanone, monophosphate成人真成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
亞利桑那菌瓊脂/SA瓊脂/Salmonella Arizona Agar亞利桑那沙門氏菌的選擇性分離250克國產/進口
SK-MEL-1(人膚黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2
NCI-H446(人小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2
NIH3T3全細胞裂解液100μg100μggersion
C918(人眼脈絡黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2
Mammalian Protein Extraction Kit/哺動物蛋白抽提試劑盒25次、100次國產
JeKo-1(人套細胞淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2
Hela S3(人宮頸細胞)5×106cells/瓶×2
中華鱉脾來源細胞英文名稱:CSSTSP1
Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)規(guī)格:3000次
小鼠畸胎瘤細胞英文名稱:F9
3T3-L1, 小鼠前脂肪細胞
人主動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
支原體肉湯培養(yǎng)基基礎/Mycoplasma Broth Base禽胚組織制備的疫苗支原體檢測40克國產/進口
Caco-2,人結直腸腺細胞
肝英文名稱:HCC-9204
I型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
人胰腺細胞英文名稱:CFPAC-1
ER培養(yǎng)基(含維生素)/Eriksson Medium with vitaminsBR10升國產/進口
人臍帶單核細胞*培養(yǎng)基100mL
WL營養(yǎng)瓊脂/華倫斯坦實驗室營養(yǎng)瓊脂/WL Nutrient Agar啤酒和發(fā)酵產品中酵母菌和細菌的計數(shù)250克國產/進口
Quetiapine (hemifumarate) (25 g)ICI 204636|Seroquel XR; 2-[2-(4-dibenzo[b,f][1,4]thiazepin-11-yl-1-piperazinyl)ethoxy]-ethanol, (2E)-2-butenedioate
FBBBE (5 mg)Fluorescein bis (benzyl boronic ester); 3’,6’-bis((4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)benzyl)oxy)-3H-spiro[isobenzofuran-1,9’-xanthen]-3-one
Neutrophil Elastase Inhibitor (50 mg)1-(3-methylbenzoyl)-1H-indazole-3-carbonitrile
SDB-006 (1 mg)1-pentyl-N-(phenylmethyl)-1H-indole-3-carboxamide