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2015版中國(guó)藥典-野菊花 HPLC分析
閱讀：4293 發(fā)布時(shí)間：2018-7-4■《中國(guó)藥典》 收載情況
【來(lái)源】 本品為菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.的干燥頭狀花序。秋、冬兩季花初開放時(shí)采摘，曬干，或蒸后曬干。
【功能與主治】 清熱解毒，瀉火平肝。用于疔瘡癰腫，目赤腫痛，頭痛眩暈。
【含量測(cè)定】 蒙花苷照液相色譜法（通則0512)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-冰醋酸（26:23:1）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為334 nm。理論板數(shù)按蒙花苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。
對(duì)照品溶液的制備：取蒙花苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇（必要時(shí)加熱）制成每1 mL含25μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備：取本品粉末(過三號(hào)篩)約0.25 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇100 mL，稱定重量，加熱回流3小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20 µL，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
■野菊花藥材液相色譜方法的建立
【色譜行為描述】
《中國(guó)藥典》中野菊花的含量測(cè)定以蒙花苷為質(zhì)量評(píng)價(jià)依據(jù)，蒙花苷在InertsilODS-3（4.6×250mm，5μm）中的色譜行為是：在流動(dòng)相組成為甲醇-水-冰醋酸系統(tǒng)時(shí)，流動(dòng)相的比例對(duì)蒙花苷及其相鄰色譜峰的分離度有一定影響，流動(dòng)相比例為甲醇：水：醋酸=52:46:2時(shí)，其分離效果與分析時(shí)間合適，選擇甲醇的比例在48%~57%（v/v）之間均可獲得較好的分析效果；柱溫對(duì)蒙花苷的保留時(shí)間及其相鄰色譜峰的分離度有微小影響，經(jīng)考察建議溫度為30℃；流動(dòng)相中醋酸對(duì)蒙花苷的分離度及拖尾因子均無(wú)明顯影響，但對(duì)分析時(shí)間有一定的改變，在醋酸濃度2%（pH=2.01）時(shí)較為合適。推薦流動(dòng)相配比范圍：甲醇：水：冰醋酸（48~57）：（41~51）：（1~5），柱溫范圍：25~35℃。綜上所述，經(jīng)考察在流動(dòng)相甲醇-水-冰醋酸比例為52:48:2，柱溫30℃的色譜條件下能得到較滿意的分析效果。
野菊花在上述色譜條件下，采用Shim-pack VP-ODS色譜柱表現(xiàn)出和Inertsil ODS-3色譜柱相似的色譜行為，保留時(shí)間和柱效相當(dāng)。
樣品來(lái)源： 本品為菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.的干燥頭狀花序。秋、冬兩季花初開放時(shí)采摘，曬干，或蒸后曬干。
對(duì)照品： 蒙花苷（成都曼斯特生物科技有限公司，批號(hào)：MUST-15101207，含量：99.51%）
對(duì)照品溶液的制備： 取蒙花苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇（必要時(shí)加熱）制成每1 mL含25μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備： 取本品粉末(過三號(hào)篩)約0.25 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇100 mL，稱定重量，加熱回流3小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
| 推薦使用色譜條件： | 儀器配置： | ||
| 色譜柱： | 5020-01732 Inertsil ODS-3 (4.6×250 mm，5μm ) | LC-20AD 高壓泵 | |
| 流動(dòng)相： | 甲醇-水-冰醋酸（26:23:1） | SPD-10AVP紫外可見光檢測(cè)器 | |
| 柱溫： | 30℃ | DGU-20A3脫氣機(jī) | |
| 檢測(cè)波長(zhǎng)： | 334nm | CTO-10ASVP柱溫箱 | |
| 流速： | 1.0mL/min | SIL-10ADVP 自動(dòng)進(jìn)樣器 | |
| 進(jìn)樣量： | 20μL | ||
| *此條件同樣適用于Shim-pack VP-ODS(4.6×250 mm, 5 μm)，相關(guān)譜圖見附注1。 | |||
■蒙花苷對(duì)照品溶液：
■供試品溶液：
■蒙花苷標(biāo)準(zhǔn)曲線：
■蒙花苷的重復(fù)性：
| 序號(hào) | 對(duì)照品（10μL） | 樣品（20μL） | ||
|---|---|---|---|---|
| t/min | 峰面積 | t/min | 峰面積 | |
| 1 | 13.041 | 1320558 | 12.924 | 1442579 |
| 2 | 13.083 | 1316741 | 12.950 | 1431804 |
| 3 | 13.020 | 1317305 | 13.013 | 1427972 |
| 平均值 | 13.048 | 1318201 | 12.960 | 1434118 |
| RSD/% | 0.24 | 0.16 | 0.35 | 0.53 |
附注1：Shim-pack VP-ODS (4.6×250mm，5μm )色譜柱用于野菊花分析
■蒙花苷對(duì)照品溶液：
■供試品溶液：
