酵母平板菌落轉化試劑盒（一步法）
英文名:Yeast Transformation Kit
儲存條件： -20 ℃儲存，未開封期24個月。
描述:
酵母菌落轉化試劑盒是以未經凍存的釀酒酵母平板菌落（搖菌）或者菌液作為菌體來源（短期4 ℃保存的平板或者菌液亦可使用），制備感受態(tài)細胞，分步熱激，一步轉化，整個操作流程在90 min內完成。省去了通過兩次培養(yǎng)獲得狀態(tài)的菌體的過程，以及制備感受態(tài)的過程，節(jié)省了1-2天的菌種培養(yǎng)轉化時間，或者購買感受態(tài)的經費。其轉化率可達酵釀酒母轉化方法（SK2400）的50-80%（常規(guī)酵母雜交菌種檢測）。轉化效率可滿足除文庫傳化之外的其它轉化實驗。
菌落轉化步驟：
1.在無菌的1.5 mL的離心管中加入100 μL的P1溶液（轉化液）。
2.在上述轉化液中加入1 μg的質粒DNA。共轉加入每種質粒各1 μg。
3.挑取2-3個較大酵母菌落加入上述轉化液中，震蕩混勻。
4.置于42 ℃水浴60 min（每隔20 min 顛倒混勻一次，避免酵母菌沉底）。
5.可選步驟：3,000 rpm離心3 min，棄上清。用400 μL YPD Plus Liquid Medium（YT0004）重懸，30 ℃搖床震蕩培養(yǎng)30-60 min。YPD Plus用于轉化后復蘇酵母菌，轉化效率可以50-。
6.3,000 rpm離心3 min。加入100 μL無菌水重懸菌體。
7.將重懸菌體涂布于相應的缺陷型培養(yǎng)基平板上。
8.30 ℃恒溫培養(yǎng)3-5天，直至平板長出菌落。
菌液轉化步驟：
收集1.5-3 mL酵母菌液沉淀后，加入100 μL P1溶液（轉化液）和1 μg質粒DNA后震蕩混勻。后續(xù)步驟和平板菌落轉化步驟4-8相同。
注意事項：
1. 轉化全程要求無菌操作。
2. 為了轉化效率，感受態(tài)不宜直接用液氮凍存。
3.增加酵母質粒的純度和濃度可以轉化效率。
供應產品目錄：
| DO Supplement -Ade |
| DO Supplement -Ade/-His |
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| DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Trp/-Met |
| DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Trp/-Ura |
| DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Trp/-Ura/-Met |
| DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Ura |
| DO Supplement -Ade/-His/-Met |
| DO Supplement -Ade/-His/-Trp |
| DO Supplement -Ade/-His/-Ura/-Trp |
| DO Supplement -Ade/-Leu |
| DO Supplement -Ade/-Leu/-His |
| DO Supplement -Ade/-Leu/-Trp |
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yyp2021.2.22
酵母平板菌落轉化試劑盒（一步法）
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