Minimal SD Base 酵母
描述：
SD（synthetically defined）系列培養基屬于Minimal medium，也可以稱為不*培養基。Minimal SD Base由硫酸銨、微量元素、葡萄糖按比例混合而成，可以提供野生型酵母菌維持生存所需的基本物質，但不包含突變菌株的氨基酸。Minimal SD Agar Base在前者基礎上加入Agar。Minimal SD Base Gal/Raf由硫酸銨、微量元素、半乳糖及棉子糖混合而成；Minimal SD Base Gal由硫酸銨、微量元素、半乳糖混合而成；Minimal SD Base Raf 由硫酸銨、微量元素、棉子糖混合而成，對應的固體培養基均在其基礎上加入Agar。
Minimal Liquid Media with Glucose (Broth)
1. 在1 L去離子水中加入相應量的Minimal SD Base和Dropout Supplements（缺陷型氨基酸混合物），攪拌溶解。
2. 調節pH 至5.8。121℃高壓15分鐘。
3. 4℃冰箱避光儲存已經的液體培養基。
酵母單雜交(Yeast one-hybrid)是根據DNA結合蛋白(即轉錄因子)與DNA順式作用元件結合調控報告基因表達的原理，克隆與靶元件結合的轉錄因子基因(cDNA)的方法。其理論基礎是：許多真核生物的轉錄子由物理和功能上的DNA結合區(DNA-binding domain BD)和轉錄區(Activation domain AD)組成，因此可構建基因與AD的融合表達載體，在酵母中表達為融合蛋白時，根據報道基因的表達情況，便能篩選出與靶元件有結合區域的蛋白。理論上，在單雜交檢測中，靶元件都可被用于篩選一種與之有結合區域的蛋白。
雙雜交系統的建立得力于對真核生物調控轉錄起始過程的認識。細胞起始基因轉錄需要有反式轉錄因子的參與。80年代的工作表明， 轉錄因子在結構上是組件式的（modular）， 即這些因子往往由兩個或兩個以上相互的結構域構成，其中有DNA結合結構域（DNA binding domain，簡稱為BD）和轉錄結構域（activation domain，簡稱為AD），它們是轉錄因子發揮功能所的。單獨的BD雖然能和啟動子結合，但是不能轉錄。而不同轉錄因子的BD和AD形成的雜合蛋白仍然具有正常的轉錄的功能。如酵母細胞的Gal4蛋白的BD與大腸桿菌的一個酸性結構域B42融合得到的雜合蛋白仍然可結合到Gal4結合位點并轉錄。
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yyp2021.2.3
Minimal SD Base 酵母
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