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蛋白質鑒定服務
服務介紹:
蛋白質組學(Proteomics)指的是大規模、高通量地研究一個細胞、組織或物種中表達的全套蛋白質的學科。近十年來,質譜技術的飛速發展大大推動了的蛋白質組學的進步,基于質譜的蛋白質組學已經成為蛋白質研究領域技術手段。通過蛋白質組學技術可以對生物樣本中的蛋白質、翻譯后修飾位點(如磷酸化)進行大規模地鑒定或定量,進而從高通量的數據分析中挖掘有價值的信息和規律,為功能機制的探究提供線索和基礎。2003年,人類基因組計劃(HGP)完成精細圖的繪制后,同年,人類蛋白質組學計劃(HPP)隨即開展起來,反映了科研領域對蛋白質組學的重視。經過十年時間,多家單位的共同努力下,人類蛋白質組草圖也于2014年在Nature雜志公布了。
目前,蛋白質組學領域成熟的研究方式采用的是(shotgun)的策略,即樣品中提取的蛋白質經過還原、烷基化、酶解的步驟變為肽段混合物,肽段再經過電噴霧進入質譜進行掃描,得到質譜譜圖,最后通過相關的軟件解析這些質譜圖就可以得到樣品中蛋白質的定性或定量信息。
30min儀器機時的蛋白質-鑒定只適用于樣本中單一蛋白純度較高的樣本的蛋白質確認性鑒定,膠條,組織蛋白混合液建議選擇100min機時的蛋白鑒定服務。
實驗流程:
蛋白提取—蛋白酶解—肽段富集—高分辨質譜檢測采集數據—數據庫檢索—數據分析
送樣運輸要求:
1、蛋白樣本
①蛋白量大于100ug,-80℃保存,純干冰運輸,避免反復凍融。
②建議測定蛋白濃度后,液氮速凍,避免蛋白降解,另外需要告知蛋白溶液的緩沖液成分和濃度,方便實驗室收到后進行后續處理。
③膠條、膠點樣本不建議進行定量蛋白質組學。
2、細胞樣本
①細胞量1x107個,收集細胞沉淀,-80℃保存,純干冰運輸,避免反復凍融。
②收集時,用預冷PBS緩沖液清洗三次,去除培養基成分,然后離心去除上清保存。
3、血清樣本
①樣本量500uL,-80℃保存,純干冰運輸,避免反復凍融。
②樣本應盡量避免溶血。
4、血漿樣本
①樣本量500uL,-80℃保存,純干冰運輸,避免反復凍融。
②樣本應盡量避免溶血。
5、尿液樣本
①樣本量2mL,-80℃保存,純干冰運輸,避免反復凍融。
②樣品應盡量避免帶入糞便殘渣。
6、動物組織樣本
①樣本量300mg,-80℃保存,純干冰運輸,避免反復凍融。
②收集時,用預冷PBS緩沖液沖洗表面血液,并用濾紙吸干多余水分,避免凍存時結冰。
③固定液浸泡過的樣本無法進行檢測。
7、植物組織樣本
①樣本量500mg,-80℃保存,純干冰運輸,避免反復凍融。
②收集時,用預冷PBS緩沖液沖洗表面泥沙,并用濾紙吸干多余水分,避免凍存時結冰。
③固定液浸泡過的樣本無法進行檢測。
8、微生物樣本
①樣本量干重200mg,-80℃保存,純干冰運輸,避免反復凍融。
②收集時,用預冷PBS緩沖液清洗三次,去除培養基成分,然后離心去除上清保存。
蛋白質鑒定服務
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