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產品描述
TRIzol的主要成分是異硫 qíng 酸胍,它可以破壞細胞,使細胞RNA釋放出來,同時保護RNA的完整性,因此,常用于動植物細胞RNA的提取。
訂購信息
產品名稱 | 貨號 | 規格 | 價格 |
TRIzol | AN51L758 | 100 mL | 328 |
運輸與保存
常溫運輸。4℃避光保存,有效期12個月。
使用方法
1.準備樣品
(1)組織樣品
液氮研磨組織法,組織塊直接放入研缽中,加入少量液氮,迅速研磨,待組織變軟,再加少量液氮,再研磨,如此三次后,按組織樣品質量與 T R I z o l 體積按照50~100mg/mL加入,勻漿。
【注】:組織體積不能超過 T R I z o l 體積的10%, 否則勻漿效果不好,用電動勻漿器勻漿約需1~2 min 。
(2)細胞
對于培養貼壁細胞:不須消化,可直接用 T R I z o l 進行消化及裂解, T R I z o l 體積按10cm²/mL比例加入。
對于懸浮細胞可直接收集,消化裂解,每1 mL T R I z o l 可裂解 5×106動物、植物或酵母細胞,或1×107細菌細胞。
【注】:此時可放入﹣70℃長期保持。
【注】:禁用漩渦振蕩器,以免基因組DNA斷裂。
5. 4℃,12,000g離心15 min 。
【注】:千萬不要吸取中間界面:若同時提取DNA和蛋白質,則保留下層酚相存于4℃冰箱,若只提RNA,則棄下層酚相。
7. 0.5ml異丙醇/mI T R I z o l 加入異丙醇混勻,室溫放置5~10 min 。
8. 4℃ 12,000g離心10 min, 棄上清,RNA沉于管底。
10. 4℃ 8,000g 離心5 min, 盡量棄上清液。
【注】:RNA樣品不要過于干燥,否則很難溶解。
12. 可用50 μL H2O、TE buffer或0.5%SDS溶解RNA樣品,55~60℃ ,5~10 min。
【注】:H2O.TE或0.5%SDS均須用DEPC處理并高壓。
注意事項
1.操作人員應經過專門培訓,嚴格遵守操作規程。
2.操作處置應在具備局部通風或全面通風換氣設施的場所進行。
3.避免眼和皮膚的接觸,避免吸入蒸汽。
4.遠離火種、熱源,工作場所嚴禁吸煙。
5.整個提RNA過程需要無RNase的實驗用具。
6.本產品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領域。
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