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產品描述
RIPA (Radio Immunoprecipitation Assay)裂解液,通過組合離子型去垢劑和非離子去污劑對組織細胞的消化作用使組織細胞崩解釋放出蛋白質,是一種經典的動物組織/細胞快速裂解液。對細胞膜、胞漿亞組分、胞核成分均有較強裂解作用,適用于PAGE、Western Blotting和免疫沉淀(IP)的研究。RIPA裂解液的配方有很多種,根據其裂解液的強度大致可以分為強、中、弱三類。可以根據后續實驗的需要選擇,具體選擇標準見下表1。
訂購信息
產品名稱 | 貨號 | 規格 | 價格 |
RIPA(強)細胞裂解液(帶抑制劑) | AP01L013 | 50 mL | 148 |
RIPA(強)細胞裂解液(帶抑制劑) | AP01L014 | 100 mL | 218 |
產品組分
產品編號 | 產品組成 | 包裝規格 |
AP01L013 | RIPA(強)細胞裂解液 | 50 mL |
PMSF 溶液(100 mM) | 1 mL | |
磷酸酶抑制劑II cocktail(50×) | 1 mL | |
產品說明書 | 一份 | |
AP01L014 | RIPA(強)細胞裂解液 | 100 mL |
PMSF 溶液(100 mM) | 1 mL | |
磷酸酶抑制劑II cocktail(50×) | 2*1 mL | |
產品說明書 | 一份 |
保存方法
裂解液4℃保存,其余-20℃保存,保質期一年。
使用方法
1. 對于培養細胞樣品
對于貼壁細胞:去除培養液,用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞1~2 s后,細胞就會被裂解。
對于懸浮細胞:離心收集細胞,按照6孔板每孔細胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液,混勻,充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,需分裝成50~100萬細胞/管,然后再裂解。具體RIPA裂解液的使用量參照表2。
2. 對于組織樣品
注意事項
產品應用 | RIPA裂解液(強) | RIPA裂解液(中) | RIPA裂解液(弱) |
裂解強度 | 強 | 中 | 溫和 |
膜蛋白的提取 | 很好 | 較好 | 一般 |
胞漿蛋白的提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
核蛋白的提取 | 很好 | 較好 | 較好 |
胞漿磷酸化蛋白提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
細胞核轉錄因子提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
主要用途 | WB, IP | WB, IP | WB, IP, co-IP |
表2: RIPA裂解液的使用量
樣品來源 | 培養容器 | 收獲細胞數 | RIPA用量 | 可制備樣品數 |
細胞 | 6孔板 | 2.5 x 106 | 150-250 μL | 400~600 |
60 mm培養板 | 5.2 x 106 | 300-500 μL | 200~300 | |
90 mm培養板 | 12.2 x 106 | 500-1000 μL | 100~200 | |
25 cm2培養瓶 | 5 x 106 | 300-500 μL | 200~300 | |
75 cm2培養瓶 | 2 x 107 | 1000-2000 μL | 50~100 | |
組織 | 20 mg組織塊 | 2.5 x 106 | 150-250 μL | 400~600 |
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