細胞轉染技術簡介

時間：2016/12/13閱讀：1412

細胞轉染技術是將外源基因導入真核細胞內的一種實驗技術。常規轉染技術分為穩定轉染（*轉染）和瞬時轉染兩類。穩定轉染是指外源DNA 既可以整合到宿主染色體中，也可能作為一種游離體存在。瞬時轉染則指外源DNA/RNA 不整合到宿主染色體中，一個宿主細胞中可存在多個拷貝數，產生高水平的表達，但通常只持續幾天，多用于啟動子和其它調控元件的分析。

轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因導入細胞的范例;化學介導方法很多，如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術;生物介導方法，有較為原始的原生質體轉染，和現在比較多見的各種病毒介導的轉染技術。

各種轉染方法的比較

轉染方法	原理	應用	特點
電穿孔法	高脈沖電壓破壞細胞膜電位，DNA通過膜上形成的小孔導入	穩定轉染，瞬時轉染均適用。	適用性廣但細胞致死率高；DNA 和細胞用量大；需根據不同細胞類型優化電穿孔實驗條件。
顯微注射	用顯微操作將DNA 直接注入靶細胞核	適用于穩定轉染和瞬時轉染	轉染細胞數有限，多用于工程改造或轉基因動物的胚胎細胞
磷酸鈣法	磷酸鈣DNA復合物吸附細胞膜被細胞內吞	適用于穩定轉染和瞬時轉染	不適用于原代細胞，操作簡便但重復性差有些細胞不適用
陽離子脂質體法	帶正電的脂質體與核酸帶負電的磷酸基團形成復合物被細胞內吞	適用于穩定轉染和瞬時轉染所有細胞	適用性廣，轉染效率高，重復性好，但轉染時需除血清；轉染效果隨細胞類型變化大
DEAE-右旋糖苷法	帶正電的DEAE-右旋糖苷與核酸帶負電的磷酸骨架相互作用形成的復合物被細胞內吞	瞬時性轉染	相對簡便、結果可重復，但對細胞有一定的毒副作用；轉染時需除血清
病毒介導法	通過侵染宿主細胞將外源基因整合到染色體中	穩定轉染	可用于難轉染的細胞、原代細胞，體內細胞等

Mirus是首先研發出siRNA轉染試劑的公司，也是世界上zui早開發、低細胞毒性轉染試劑的公司之一。Mirus以“非病毒(如基于質粒DNA)法基因轉移技術比利用病毒來轉移基因具有明顯的優勢”為理念，沿著該思路，Mirus利用蛋白、多聚物、脂質體（結合有增強核酸轉移能力的*化學物）開創了多種非病毒法基因轉移技術。主要提供的轉染試劑有：廣譜性低毒轉染試劑、細胞系特異性轉染試劑、RNA轉染試劑、昆蟲轉染試劑、3D培養細胞轉染試劑和電轉試劑等。

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