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超分辨單分子動力分析儀
(熒光光鑷)--C-Trap,是世界上將光鑷、共聚焦或STED 超分辨顯微鏡和微流控系統(tǒng)結(jié)合的單分子操控儀器。C-Trap通過高度聚焦激光束產(chǎn)生的力來操作納米/微米顆粒,并且結(jié)合力學檢測系統(tǒng)和共聚焦或 STED 超分辨顯微鏡,可以定位反應(yīng)的結(jié)合位點,實時監(jiān)測生物分子的單分子動力學特性。C-Trap可以揭示大量分子相互作用的機制,包括:DNA的修復(fù)、復(fù)制和轉(zhuǎn)錄、生物分子馬達和酶、DNA/RNA的結(jié)構(gòu)動力學蛋白質(zhì)的折疊(去折疊)、細胞的運動機制等信息。
技術(shù)特征:
√ 多重連續(xù)激光光阱捕獲
√ 的剛性范圍
√ 較低的力學噪聲
√ 的3D捕獲定位
√ 超穩(wěn)定負壓驅(qū)動微流體
√ 自動控制的微流控芯片
√ 高度相關(guān)的力學-熒光數(shù)據(jù)采集
√ 多重共聚焦掃描熒光顯微鏡
√ 單光子靈敏度
√ 可升級到STED超分辨率
技術(shù)原理:
主要由微液流控制系統(tǒng)、光鑷操縱系統(tǒng)、力學檢測系統(tǒng)以及共聚焦(超分辨率顯微鏡)成像系統(tǒng)組成。微液流控制系統(tǒng)采用分通道集成設(shè)計,避免反應(yīng)體系交叉污染,確保多步驟生物反應(yīng)原位進行;光鑷系統(tǒng)通過高度聚焦激光束產(chǎn)生的力來操作納米或微米級的介電質(zhì)顆粒,實現(xiàn)了對生物分子的單分子水平的操縱;結(jié)合力學檢測系統(tǒng)和共聚焦(超分辨率顯微鏡)成像系統(tǒng),同時從力學和光學角度,高精度定位反應(yīng)的結(jié)合位點,實時監(jiān)測生物分子的單分子動力學特性。
超分辨單分子動力分析儀
應(yīng)用領(lǐng)域:
應(yīng)用包括:利用 CTFM(Correlative Tweezers – Fluorescence Microscopy)揭示大量分子相互作用機制的詳細信息
DNA的修復(fù) | 中間纖維 | 核糖體的翻譯 | 細胞的運動機制 |
DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄 | 生物分子馬達和酶 | 細胞膜的相互作用 | DNA-DNA的相互作用 |
DNA發(fā)夾結(jié)構(gòu)動力學 | DNA/RNA的結(jié)構(gòu)動力學 | 蛋白質(zhì)的折疊(去折疊) | DNA的組織化和染色質(zhì)化 |
規(guī)格參數(shù)
■ 熒光光鑷:
檢測范圍:50μ m×50μ m×35μ m(x,y,z)
獨立光阱數(shù)目:1-4
光阱類型:持續(xù)的激光提供穩(wěn)定精確的高強度捕獲
力學檢測分辨率: <0.1pN @100Hz, 2μ m 聚苯乙烯微球(由生物樣品決定)
大逃逸力:1000pN , 4.5μm 聚苯乙烯微球
應(yīng)力穩(wěn)定性:<1pN
光阱轉(zhuǎn)角頻率:0.1kHz-15kHz光阱距離分辨率:<0.3nm @100Hz
小步移: <0.5nm
光阱移動特性:所有光阱可在 x,y 平面獨立移動;1+2,3+4 可在三維空間成對移動
運動微球追蹤精確度:<3nm @ 100Hz 視頻分析
■ 共聚焦顯微鏡:
可視范圍:50μm×35μm(x,y)
共聚焦顏色*:多可三色共用,從 488nm 到 647nm 之間的十種波長中選擇
共聚焦分辨率: 衍射極限之內(nèi)
STED 分辨率*:<35nm
掃描速度:線性掃描速度 200Hz
定位精度:<15nm
光斑定位精確度:<1nm
背景抑制極限:100nM @1ms 積分時間
敏感度:極低的亮度檢測極限以及單光子計數(shù)。可檢測單個 eGFP
其他值得注意的特點:和光鑷*的結(jié)合,交互式體驗
■ u-Flux 微流控:
微流控流動系統(tǒng):負壓系統(tǒng)可以在層流環(huán)境下檢測到亞納米級別的位移
用于遠程操控的自動閥
無位移偏差
單分子測量零干擾
多達11個注射器可以接到流動池上來實現(xiàn)復(fù)雜的多重蛋白分析
操作軟件:
C-Trap便捷直觀的雙屏顯示界面給您的實驗操作帶來極大便利;您可通過手動點擊操縱桿或通過簡單的命令來自動控制諸如光阱位置,平臺位置,微流體以及數(shù)據(jù)記錄等過程。以用戶為中心的軟件操作界面以及簡易的操作流程使復(fù)雜的單分子實驗過程(微球捕獲,分子的連接,隨后的操縱以及成像整個過程)在數(shù)分鐘之內(nèi)即可完成。