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Tet on/off鼠糧簡單介紹

閱讀:1578        發(fā)布時間:2018-10-13

    基于四環(huán)素誘導(dǎo)的小鼠基因表達系統(tǒng)(Tet-based)已經(jīng)廣泛地應(yīng)用于實驗研究中。此系統(tǒng)利用多西霉素(Doxycycline,四環(huán)素類似物,也稱強力霉素)可逆地對目的蛋白表達進行自由地開和關(guān),非常方便地在小鼠任何發(fā)育階段觀察小鼠的表型變化;而且對于基因的可控開關(guān)還有效避免了持續(xù)表達基因引起的轉(zhuǎn)基因小鼠傳代后的基因沉默。
    目前由于多西霉素鼠糧Tet on/off鼠糧需從國外進口,價格高周期長,很多研究人員采用水中添加進口多西霉素的方式誘導(dǎo)。但是多西霉素在水中不穩(wěn)定且需避光,需頻繁更換水,耗費大量人力物力,誘導(dǎo)效果不理想,結(jié)果不穩(wěn)定;而且由于多西霉素有苦味,需在水中添加高濃度糖分,可能影響小鼠表型的評估。
    我們采用高質(zhì)量的多西霉素,系統(tǒng)比較了不同誘導(dǎo)濃度的效果,采用特殊的飼料加工工藝保證多西霉素活力,zui后在Tet-based的組織特異性雙轉(zhuǎn)基因小鼠中測試飼料,研發(fā)出誘導(dǎo)基因表達的新一代多西霉素鼠糧。除了在轉(zhuǎn)基因小鼠中使用,該鼠糧還可以誘導(dǎo)移植到小鼠上的導(dǎo)入相關(guān)DNA元件的細胞的蛋白表達。
    鼠糧為高精飼料配方,用鈷60照射殺菌。未見添加的多西霉素影響小鼠的生長發(fā)育和繁殖。

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