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水溶性SEC柱

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  • 型號 Zenix
  • 品牌
  • 廠商性質(zhì) 代理商
  • 所在地 廣州市
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更新時間:2016-09-19 19:59:32瀏覽次數(shù):1502

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產(chǎn)品簡介

水溶性SEC柱采用單分散、球形、表面鍵合了一層納米厚度中性親水性薄膜的3 µm硅膠作為填料。3μm的粒徑結(jié)合大的孔體積使其成為目前上分辨率Z高的體積排阻柱。

詳細介紹

Zenix體積排阻色譜柱采用單分散、球形、表面鍵合了一層納米厚度中性親水性薄膜的3 µm硅膠作為填料。3μm的粒徑結(jié)合大的孔體積使其成為目前上分辨率zui高的體積排阻柱。賽分科技*的表面鍵合技術(shù)保證了填料表面鍵合的zui大化,使其 具有高的化學(xué)穩(wěn)定性及zui小的非特異性吸附。Zenix系列體積排阻柱有100、150及300Å三種孔徑選擇,廣泛的應(yīng)用于生物分子及水溶性聚合物的分離 與分析。

 

● 3 μm粒徑
● 100、150、300 Å的孔徑選擇
● *的分離效率和分辨率
● 高容量
● 在低和高鹽濃度下有高穩(wěn)定性
● 批間重復(fù)性
● 高的蛋白回收率而不破壞生物活性
● 可忽略的非特異性反應(yīng)
● 蛋白、核酸、寡核苷酸、多肽和病毒類生物分子能實現(xiàn)理想的分析和分離
● 自然多聚體(如:多糖)、合成多聚體和納米材料(如:納米顆粒)能夠?qū)崿F(xiàn)理想的分析和分離

 

zui高的分辨率

 

    開發(fā)小粒徑填料的優(yōu)勢在于能實現(xiàn)更高的分離效率和分辨 率。當粒徑從5 μm降至3 μm時,柱效幾乎為原先的兩倍。如圖1和表1所示:當填料粒徑從5 μm降至3 μm時,BSA二聚體、BSA、核糖核酸酶A的塔板數(shù)分別從2720、6590、11160提高到4600、13090、22000。圖2和表2進一步表 明3 μm Zenix柱在分離各種蛋白時能實現(xiàn)更高的分離效率。P-氨基苯甲酸使用30 cm長的Zenix柱時能夠達到40,000的塔板數(shù)。

 

圖1. Zenix SEC-300和SRT SEC-300分離蛋白混合物A 

17.jpg

色譜柱:    Zenix SEC-300和SRT SEC-300
流動相:    150mM Sodium phosphate buffer, pH 7.0
流速:        7.8x300 mm為1.0 mL/min; 4.6x300 mm為0.35 mL/min
溫度:        室溫(~23℃);        
檢測器:    UV 214 nm
進樣量:    10 μL (4.6x300 mm為3 μL)
樣品:      1) 甲狀腺球蛋白(1.0 mg/mL), 670 kD; 2) BSA二聚體, 132 kD;          3)  BSA (1.0 mg/mL), 66 kD; 4) 核糖核酸酶A (1.0 mg/mL), 13.7 kD; 5) 尿嘧啶(2.5 μg/mL), 120 D

 

 

 
表1. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分離效率

蛋白

Zenix 300   

Zenix 300

SRT 300

(4.6x300) 

(7.8x300)

(7.8x300)

1

甲狀腺球蛋白

2180

1730

1120

2

BSA二聚體

4390

4600

2720

3

BSA

10280

13090

6590

4

核糖核酸酶A

16490

22000

11160

5

尿嘧啶

33640

38500

27860

                                                   

 

 

圖2. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分離效率 (內(nèi)徑為7.8 mm)

 

18.jpg色譜柱:   Zenix SEC (7.8x300 mm, 3 µm)
流動相:   150 mM PBS, pH 7.0
流速:      1.0 mL/min
反壓:      Zenix SEC-300為1,375 psi, Zenix SEC-150為1,100psi
溫度:     室溫(~ 23℃)
檢測波長:  214 nm
進樣量:   10 μL
樣品:    1)甲狀腺球蛋白 (1.0 mg/L), 670 kD; 2)BSA二聚體, 132 kD; 3) BSA (1.0 mg/L), 66 kD; 4)核糖核A (1.0 mg/L), 13.7 kD; 5) 尿嘧啶 (2.5 μg/mL), 120 D.

 

 

    

表2. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分離效率

 

 

蛋白

Zenix 150

Zenix 300

1

甲狀腺球蛋白

18050

2460

2

BSA二聚體

2420

5110

3

BSA

5620

13090

4

核糖核酸酶A

17600

22000

5

尿嘧啶

42000

38500

                                                        

 

 

高載樣量

 

    載樣量是衡量體積排阻色譜柱性能的重要指標之一,下圖表明Zenix系列分析色譜柱在BSA上樣量高達500 µg的情況下,仍保持著*的分析峰形。

 

圖3. Zenix SEC-150 色譜柱對BSA載樣量的測試圖譜

 

19.jpg

色譜柱:      Zenix SEC-150 (3 µm, 7.8x300 mm)
流動相:      150 mM Sodium phosphate buffer, pH 7.0
流速:          1.0 mL/min
進樣量:      10 µL
檢測器:      UV 214 nm

 

 

 

圖4. Zenix SEC-300 色譜柱對BSA載樣量的測試圖譜


色譜柱:     Zenix SEC-300 (3 µm, 7.8x300 mm)
流動相:     150 mM Sodium phosphate buffer, pH 7.0
流速:         1.0 mL/min
進樣量:     10 µL
檢測器:     UV 214 nm

 

 

 
高穩(wěn)定性

 

    賽分科技*的表面修飾技術(shù)使得硅膠表面的鍵合密度達到 zui大化,從而阻止了能夠促進鍵合相脫落的溶劑分子向薄膜內(nèi)側(cè)的擴散,保證了其在pH 2-8.5范圍的穩(wěn)定使用。Zenix體積排阻柱適用于大多數(shù)水性及有機溶劑,包括:醋酸、磷酸、Tris緩沖鹽體系、甲醇、乙醇、THF、DMF、 DMSO等,同時可耐受高鹽溶液,如2.0 M的NaCl。


流動相的兼容性

 

    Zenix SEC固定相能與大多水相緩沖液兼容,如醋酸銨、磷酸鹽、Tris等。Zenix SEC固定相能夠承受高濃度鹽,如2.0 M。同時Zenix SEC柱在有機溶劑中,如甲醇、乙醇、四氫呋喃、2,5-二甲基呋喃、二甲基亞砜等,水和有機溶劑混合相中均能保持穩(wěn)定。


高蛋白回收率

 

    Zenix SEC固定相為親水性和中性,蛋白和其他生物分子與固定相之間的非特異性吸附可忽略??梢种频鞍孜降焦枘z固定相表面的作用,從而能夠?qū)崿F(xiàn)蛋白高的回收率,在分離后能夠保持蛋白的活性。酸性和堿性蛋白的代表BSA和溶菌酶的回收率能夠高于95%。

 

Zenix SEC色譜柱技術(shù)參數(shù)表

固定相

Zenix SEC-80

Zenix SEC-100

Zenix SEC-150

Zenix SEC-300

材料

表面鍵合親水薄膜的硅膠

表面鍵合親水薄膜的硅膠

表面鍵合親水薄膜的硅膠

表面鍵合親水薄膜的硅膠

顆粒大小

3 µm

3 µm

3 µm

3 µm

孔徑 (Å)

~ 80

~ 100

~ 150

~ 300

蛋白分子量范圍

100 – 50,000

100 - 100,000

500 - 150,000

5,000 – 1,250,000

水溶性聚合物分子量范圍

500 – 5,000

500-10,000

500-25,000

1,000-100,000

pH 穩(wěn)定性

2 –8.5,短時間可耐pH 8.5-9.5

2 – 8.5,短時可耐pH 8.5-9.5

2 – 8.5,短時可耐pH 8.5-9.5

2 – 8.5,短時可耐pH 8.5-9.5

反壓 (for a 7.8x300 mm)

~ 1,500 psi 

~ 1,500 psi 

~ 1,500 psi 

~ 1,500 psi

zui大耐受壓力 (psi)

~ 4,500

~ 4,500

~ 4,500

~ 3,500

鹽濃度范圍

20 mM - 2.0 M

20 mM - 2.0 M

20 mM - 2.0 M

20 mM - 2.0 M

zui高使用溫度 (oC)

~ 80

~ 80

~ 80

~ 80

流動相的兼容性

常規(guī)水相及有機相溶劑

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