高效液相色譜法的發展歷史
1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。高效液相色譜使用粒徑更細的固定相填充色譜柱,提高色譜柱的塔板數,以高壓驅動流動相,使得經典液相色譜需要數日乃至數月完成的分離工作得以在幾個小時甚至幾十分鐘內完成。1971年科克蘭等人出版了《液相色譜的現代實踐》一書,標志著高效液相色譜法(HPLC)正式建立。在此后的時間里,高效液相色譜成為最為常用的分離和檢測手段,在有機化學、生物化學、醫學、藥物開發與檢測、化工、食品科學、環境監測、商檢和法檢等方面都有廣泛的應用。高效液相色譜同時還極大的刺激了固定相材料、檢測技術、數據處理技術以及色譜理論的發展。1960年代前,使用的填充粒大于100μm,提高柱效面臨著困境,后來的研究人員便采用微粒固定相來突破著一瓶頸。科克蘭、荷瓦斯制備成功薄殼型固定相,這種在固定相在玻璃微球表面具有多孔薄殼,實現了高速傳質,為高效液相色譜技術的發展奠定了穩固的基礎。隨著填料粒徑的降低,更高的柱效也得以實現。1960年代研制出氣動放大泵、注射泵及低流量往復式柱塞泵,但后者的脈沖信號很大,難以滿足高效液相色譜的要求。1970年代,往復式雙柱塞恒流泵,解決了這一問題。1970年代后科克蘭制備出全多孔球形硅膠,平均粒徑只有7μm,具有好的柱效,并逐漸取代了無定形微粒硅膠。之后又制造出的鍵合固定相使柱的穩定性大為提高,多次使用成為可能。1970年后,適合分離生物大分子的填料又成為研究的熱點。1980年后,改善分離的選擇性成為色譜工作者的主要問題,人們越來越認識到改變流動相的組成事提高選擇性的關鍵。
北京創新通恒科技有限公司是一家致力于分離技術研究及應用的高科技企業。從2000年成立之日起,創新通恒人本著銳意創新,不斷進取的精神,秉承“以液相色譜技術為核心,不斷拓展應用領域,滿足客戶不同需求“的企業發展宗旨,攻克了一個又一個技術難關,在色譜產品領域,成為國內較大的研究、制造企業之一。產品包括實驗室高效液相色譜系統、中試型制備液相色譜系統、生產型工業化制備液相色譜系統;產品線貫穿醫藥、化工領域內,質檢、研發、規模化生產的整個過程。在提供全套硬件設備的同時,創新通恒還擁有分離純化工藝研究的中試車間,可向客戶提供整體解決方案。
高效液相色譜儀的應用
高效液相色譜法適于分析高沸點不易揮發的、受熱不穩定易分解的、分子量大、不同極性的有機化合物;生物活性物質和多種天然產物;合成的和天然的高分子化合物等。
食品是人類生活中*的必需品,是人類生命活動能量的來源。食品種類繁多,各種食品具有不同的特性和營養成分,它所包含的糖、有機酸、維生素、氨基酸等直接關系到人體的健康。在食品生產過程中,往往需要添加防腐劑、抗氧化劑、人工合成色素、甜味劑、保險劑等化學物質,它們的含量過高就會危害人體健康。此外由于環境污染,也會使食品沾染有害的微量元素、農藥殘留、獸藥殘留等。
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