上海申知心生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: 高血脂癥動物模型,心血管疾病動物模型,缺血性心臟病動物模型 |
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transwell侵襲
transwell侵襲實驗就是用一層膜將高營養(yǎng)的培養(yǎng)液和低營養(yǎng)的培養(yǎng)液隔開,細(xì)胞放在低營養(yǎng)的培養(yǎng)液里,細(xì)胞會往高營養(yǎng)的培養(yǎng)液方向移動。應(yīng)用不同孔徑和經(jīng)過不同處理的聚碳酸酯膜,就可以進(jìn)行共培養(yǎng)、細(xì)胞趨化、細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲等多種方面的研究。
(1)共培養(yǎng)體系:
小于3.0um孔徑條件下,細(xì)胞不會遷徙通過,因此,若研究不涉及細(xì)胞運動能力,不需要細(xì)胞穿過聚碳酸酯膜,則應(yīng)選擇3.0μm以下孔徑。常用0.4、3.0μm。我們實驗室用的是0.4μm。將細(xì)胞A種于上室,細(xì)胞B種于下室,可以研究細(xì)胞B分泌或代謝產(chǎn)生的物質(zhì)對細(xì)胞A的影響。
(2)趨化性實驗
可用5.0、8.0、12.0μm膜,上室細(xì)胞可穿過聚碳酸酯膜進(jìn)入下室,計數(shù)進(jìn)入下室的細(xì)胞量可反映下室成分對上室細(xì)胞的趨化能力。
①細(xì)胞B對細(xì)胞A的趨化作用:將細(xì)胞A種于上室,細(xì)胞B種于下室,可以研究細(xì)胞B分泌或代謝產(chǎn)生的物質(zhì)對細(xì)胞A的趨化作用。
②趨化因子對細(xì)胞的趨化作用:將細(xì)胞種于上室,下室加入某種趨化因子,可研究該趨化因子對細(xì)胞的趨化作用。
(3)腫瘤細(xì)胞遷移實驗
常用8.0、12.0μm膜,上室種腫瘤細(xì)胞,下室加入FBS或某些特定的趨化因子,腫瘤細(xì)胞會向營養(yǎng)成分高的下室跑,計數(shù)進(jìn)入下室的細(xì)胞量可反映腫瘤細(xì)胞的遷移能力。
(4)腫瘤細(xì)胞侵襲實驗常用8.0、12.0μm膜,原理與腫瘤細(xì)胞遷移實驗類似。在聚碳酸酯膜上涂上一層基質(zhì)膠,模仿細(xì)胞外基質(zhì),上室種腫瘤細(xì)胞,下室加入FBS或?qū)嶒炘O(shè)定的藥物或者影響因子,細(xì)胞會分泌相關(guān)酶類消化模擬細(xì)胞外基質(zhì)膜的基質(zhì)膠,從而從上室遷移到下室,通過計數(shù)進(jìn)入下室的細(xì)胞量測定細(xì)胞的侵襲能力。
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