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產品及特點:
1. 產品僅用于科研即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據伴放線放線桿菌保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
產品名稱 | 巴西副球孢子菌PCR檢測試劑盒多少錢 |
英文名稱 | Paracoccidioides brasiliensisPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
運輸及保存:
巴西副球孢子菌PCR檢測試劑盒多少錢低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據機型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,產品僅用于科研只提供可以直接使用的DNA段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數量相應增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加):
三十六中文名稱: 三十六其他名稱: 正三十六;三十六碳英文名稱: Hexatriacontane其他名稱: n-Hexatri-acontane產品規格: AR,97%包裝:10克/25克/100克
焦碳二乙酯中文名稱: 焦碳二乙酯其他名稱: 氧二甲二乙酯;二碳二乙酯;重碳二乙酯;焦炭二乙酯英文名稱: DEPC其他名稱: DEP;Diethyl dicarbonate;Diethyl oxydiformate;Ethoxyformic acid anhydride;Pyrocarbonic acid diethyl ester產品規格: 高純,97.5%包裝:10毫升/100毫升/1升
4-N,N-二甲基氨基偶氮-4`-異硫氰酯其他名稱;4-(二甲氨基)偶氮-4ˊ-異硫氰酯;4-二甲氨基偶氮-4'-硫代異氰酯;4-二甲氨偶氮-4’-異硫氰酯;4-(N,N-二甲基氨基)偶氮-4'-異硫氰酯英文名稱: DABITC其他名稱: 4-N,N-Dimethylaminoazobenzene-4'-isothiocyanate;4-(4-Isothiocyanatophenylazo)-N,N-dimethylaniline產品規格: BR,97%包裝:250毫克/1克CAS號:7612-98-8
萘酚AS-MX磷鹽其他名稱: 色酚AS-MX磷鹽;磷萘酚AS-MX英文名稱: Naphthol AS-MX phosphate產品規格: 高純,99%包裝:500毫克/1克CAS號:1596-56-1C19H18NO5P=371.32
萘酚AS-TR乙酯其他名稱: 色酚AS-TR醋鹽;酚AS-D醋英文名稱: Naphthol AS-TR acetate其他名稱: Naphthol AS-D chloroacetate;3-Hydroxy-2-naphthoic-o-toluidide chloroacetate產品規格: BR,98%包裝:100毫克/1克CAS號:35245-26-2
萘酚AS-TR磷鹽英文名稱: Naphthol AS-TR Phosphate其他名稱: 3-[(4-Chloro-o-tolyl)carbamoyl]-2-naphthylphosphoric Acid產品規格: BR,95%包裝:200毫克CAS號:2616-72-0C18H15ClNO5P=391.74
萘酚AS-BI磷二鈉其他名稱: 萘酚磷鈉;磷萘酚AS-BI鈉鹽英文名稱: Naphthol AS-BI phosphate disodium salt其他名稱: 2-Naphthalenecarboxamide;7-bromo-N-(2-methoxyphenyl)-3-(phosphonooxy)-, disodium salt產品規格: BR,99.5%包裝:100毫克/1克CAS號:530-79-0
萘酚AS-BI磷鹽英文名稱: Naphthol AS-BI phosphate其他名稱: 7-Bromo-3-hydroxy-2-naphthoic-o-anisidide phosphate產品規格: BR,95%包裝:100毫克/500毫克CAS號:1919-91-1C18H15BrNO6P=452.19
巴西副球孢子菌PCR檢測試劑盒多少錢Ethyl 2-hydroxybenzoate 質量規格:>95%,BR
2,6-Difluorobenzamide 質量規格:>95%,BR
NA 質量規格:>95%,BR
CIS-ACONITIC ACID 質量規格:>95%,BR
N,N-Dimethyformamide diethy acetal 質量規格:>95%,BR
Boron carbide 質量規格:>95%,BR
Oxanilide 質量規格:>95%,BR
isocetic acid 質量規格:>95%,BR
技術特點:
1產品僅用于科研準確可靠,臨床雙盲對照試驗>1000例,結果與金標準測序法比對,結果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個檢測流程只需3小時。
4簡便:試劑盒提供預混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結合必需*配對,才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產物配對,在延伸中產生熒光。