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產品及特點:
1. 產品僅用于科研即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據伴放線放線桿菌保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
產品名稱 | 新星諾卡菌PCR檢測試劑盒價格 |
英文名稱 | Nocardia novaPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
運輸及保存:
新星諾卡菌PCR檢測試劑盒價格低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據機型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,產品僅用于科研只提供可以直接使用的DNA段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數量相應增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加):
亞鈉其他英文名稱: Sodium benzenesulfinate產品規格: CP,98.5%包裝:100克CAS號:873-55-2C6H5NaO2S=164.16級別:CP
甲酐其他名稱: 甲酐;酐;安息香酐;芐酐英文名稱: Benzoic anhydride其他名稱: Benzoic acid anhydride產品規格: ACS,99%包裝:25克/100克/500克CAS號:93-97-0
間氨基甲中文名稱: 間氨基甲其他名稱: 3-氨基甲;M-氨基甲;間甲英文名稱: 3-Aminobenzoic acid其他名稱: m-aminobenzoic acid產品規格: AR,99%包裝:25克/100克/500克
鄰甲甲中文名稱: 鄰甲甲其他名稱: 2-甲基甲;鄰叨甲;鄰甲;鄰甲;鄰甲基甲英文名稱: o-Toluic acid其他名稱: 2-Methylbenzoic acid;o-Toluylic acid產品規格: AR包裝:25克/100克/500克
間甲甲英文名稱: m-Toluic acid其他名稱: 3-Methylbenzoic acid;m-Toluylic acid產品規格: CP,99%包裝:100克/500克CAS號:99-04-7C8H8O2=136.15
對甲甲英文名稱: p-Toluic acid其他名稱: 4-Methylbenzoic acid;p-Toluylic acid產品規格: CP,99%包裝:25克/100克/500克CAS號:99-94-5C8H8O2=136.15
3-硝基甲英文名稱: 3-Nitrobenzoic acid其他名稱: m-Nitrobenzoic acid產品規格: CP,99%包裝:25克/100克/500克CAS號:121-92-6C7H5NO4=167.12
2-甲其他名稱: 鄰甲;鄰芐英文名稱: OCBA其他名稱: 2-Chlorobenzoic acid;2-Chlorobenzoic Acid產品規格: CP,98%包裝:25克/100克/500克CAS號:118-91-2
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技術特點:
1產品僅用于科研準確可靠,臨床雙盲對照試驗>1000例,結果與金標準測序法比對,結果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個檢測流程只需3小時。
4簡便:試劑盒提供預混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結合必需*配對,才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產物配對,在延伸中產生熒光。