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注意事項:
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。產品僅用于科研操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
參數規格:
產品名稱:瘰疬分支桿菌PCR檢測試劑盒在哪里有賣
英文名稱:Mycobacterium scrofulaceumPCR
產品規格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:
本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
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PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產品僅用于科研按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
產品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應組成一個循環,通過多次循環反應,使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側的兩條單鏈互補結合,兩個引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
瘰疬分支桿菌PCR檢測試劑盒在哪里有賣原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
氧化釔/釔氧/三氧化二釔/氧化釔(III)/Yttrium oxide4N10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1314-36-9RT
蜂蠟/蜜蠟/中國蠟/蟲蠟/川蠟/黃蠟/白蟲蠟/白蜂蠟/白蠟/Bees wax,whiteCP250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,8012-89-3RT
地蠟/微晶蠟/CeresinLR500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,8001-75-0RT
切片石蠟/石蠟/石油蠟/石油烴蠟/微晶石蠟/石油地蠟/白石蠟/Paraffin with ceresinBR,48-50℃500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,8002-74-2RT
佛手油/香檸檬油/枸櫞油/香櫞油/佛手柑油/保加莫油/Bergamot OilBR100毫升Serva8007-75-8RT
蓖麻油/Castor oilCP500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,8001-79-4RT
桂皮油/桂油/肉桂油/玉桂油/山扁豆油/C.I.縮合硫化黃3/縮聚嫩黃6G/Cinnamon oilLR,80%100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,8007-80-5RT
丁香油/丁子香油/丁香葉油/Clove oilBR,85%100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,8000-34-8RT,避光
土耳其紅油/太古油/蓖麻油磺酸鈉/紅油/滲透油CTH/磺化蓖麻油/硫酸化蓖麻油/Castor oil sulfonateCP500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,8002-33-3RT
香柏油/柏木油/檜油/洋杉木油/金松油/雪松醇/雪松油/油鏡油/Cedarwood oilFMP25毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,8000-27-9RT,避光
橄欖油/洋橄欖油/Olive oilCP500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,8001-25-0RT
但馬膠/但馬樹脂/達麻脂/達瑪膠/達瑪樹膠/娑羅雙樹脂/達馬樹脂/Gum dammarBR500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9000-16-2RT
乳香膠/乳香/瑪帝樹膠/瑪帝脂/瑪帝樹脂/瑪締脂/膠粘劑/乳香樹脂/瑪珶脂/粘膠乳香樹膠/膠粘水泥/Gum masticBR500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,61789-92-2RT
山達膠/山達脂/非洲松香/檜膠/方苞非洲柏膠/Gum sandaracBR500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9000-57-1RT
瘰疬分支桿菌PCR檢測試劑盒在哪里有賣Porcine Reovirus豬呼腸孤病毒RT-PCR試劑盒
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