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技術特點:
1溶酪巨球菌PCR檢測試劑盒在哪里有賣準確可靠,臨床雙盲對照試驗>1000例,結果與金標準測序法比對,結果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個檢測流程只需3小時。
4簡便:試劑盒提供預混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5防污染
6產品僅用于科研高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結合必需*配對,才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產物配對,在延伸中產生熒光。
產品名稱 | 溶酪巨球菌PCR檢測試劑盒在哪里有賣 |
英文名稱 | Macrococcus caseolyticusPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
產品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據伴放線放線桿菌保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續污染。
5. 產品僅用于科研本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
運輸及保存:
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據機型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數量相應增加2或3倍。
11. 產品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加):
金屬硫蛋白/Metallothionein/MT混合體,95%10毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
肌紅蛋白/肌球素/肌血球素/Myoglobin from equine skeletal muscleBR,95-*250毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,100684-32-0保存:-20℃
瓊脂糖凝膠4B蛋白A/Protein A-Sepharose 4B, Fast Flow from Staphylococcus aureusBR1毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,2~8℃
纖粘連蛋白/纖連蛋白(人血)/纖鏈蛋白/粘連蛋白/纖維結合素/血清纖維結合蛋白/CIG細胞培養級,95%1毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,86088-83-7保存:-20℃
β-乳球蛋白/β-LactoglobulinBR,90%250毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9045-23-22~8℃
PUC18/PUC18質粒BR20微克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
PUC19/PUC19質粒BR20微克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
結合珠蛋白/ Haptoglobin from pooled human plasmaBR,95%1毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9087-69-8保存:-20℃
氧合血紅蛋白/Oxyhemoglobin分子生物學100毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
蛋白穩定化試劑/PrionexBR100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,2~8℃
泛素/UbBR,98%25毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,79586-22-42~8℃
α-乳白蛋白/乳白蛋白/α-乳清蛋白/α-LactalbuminBR,85%25毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9051-29-0保存:-20℃
植物激素及核酸類
赤霉素GA4+7/Gibberllin A4+7BR,90%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,2~8℃
溶酪巨球菌PCR檢測試劑盒在哪里有賣Ammonium hexachlororhodate(III) 質量規格:>97%,BR
TETRA-N-OCTYLPHOSPHONIUM BROMIDE 質量規格:>98%,BR
Ferrous oxalate 質量規格:>98%,BR
Sodium metavanadate 質量規格:>98%,BR
1-Bromo-3-methoxypropane 質量規格:>98%,BR
ALEURITIC ACID 質量規格:>98%,BR
4-Methoxybenzenesulfonyl chloride 質量規格:>98%,BR
2-(Ethylamino)ethanol 質量規格:>98%,BR