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購買感覺態細胞客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的產品名稱、種屬、貨號、數量、協商細胞價格并預約發貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。產品僅用于科研
產品名稱 | 感覺態細胞 |
包裝 | 100ul*20 |
分類 | 克隆感受態細胞 |
培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質粒或連接產物)并用手撥EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少15小時。
存
玉米赤霉烯酮快速檢測卡
萊克多巴胺(ractopamine)快速檢測卡
三聚氰胺(Melamine)快速檢測卡
鹽酸克倫特(瘦肉精)檢測卡
沙丁胺醇快速檢測卡
產品名稱
人類MTHFR和MTRR基因多態性檢測試劑盒
人類ALDH2基因多態性檢測試劑盒
人類CYP2C19基因多態性檢測試劑盒
人類CYP2C9和VKORC1基因多態性檢測試劑盒
人類CYP2D6基因多態性檢測試劑盒
人類UGT1A1基因多態性檢測試劑盒
人類TP53基因突變檢測試劑盒
結核分枝桿菌特異性細胞免疫反應檢測試劑盒(IGRA)
核酸提取試劑盒(YC-A)
核酸提取試劑盒(YC-G)
黃曲霉PCR試劑盒
續斷苷B化學對照品HPLC≥95%20mg
感覺態細胞二氫大豆苷化學對照品HPLC≥95%20mg
氧化表小檗堿化學對照品HPLC≥95%20mg
寶藿苷V化學對照品HPLC≥98%20mg
寶藿苷VII化學對照品HPLC≥98%20mg
槐黃醇化學對照品HPLC≥98%20mg
鴉膽子素 D化學對照品HPLC≥98%20mg去氫紫堇堿化學對照品HPLC≥98%20mg
1,4-二[4-(葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯化學對照品HPLC≥98%20mg
丹參酮甲酯化學對照品HPLC≥98%20mg
20R-人參皂苷Rg2化學對照品HPLC≥98%20mg
三七素化學對照品HPLC≥98%20mg
齒孔酸; 齒孔菌酸化學對照品HPLC≥96.5%20mg
馬兜鈴內酰胺A化學對照品HPLC≥98%20mg
注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態細胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態細胞為例。
2.待感受態細胞融化后,向感受態細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養45分鐘使菌體復蘇
5.根據實驗需求,取適量已轉化的感受態細胞,加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養,37℃培養12-16小時。