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傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

Lenti-X293T人腎上皮細胞系

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應(yīng)先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應(yīng)盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Promocell C-22010 Endothelial Cell Growth Medium, 內(nèi)皮細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml 小鼠白介素28A(IL-28A)ELISA試劑盒 5HT3C： 5-羥色胺受體3C抗體 成骨細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

HuH-7(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠白介素28(IL-28)ELISA試劑盒 5HT3D + 5HT3E Receptor： 5-羥色胺受體3D+3E抗體 人脈絡(luò)絲表皮細胞 (HCPEpiC)( 5×105 )

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3 小鼠白介素28(IL-28)ELISA試劑盒 5HT3D Receptor： 5-羥色胺受體3D抗體 人皮膚鱗癌細胞;A-431 [A431] 大鼠小腸粘膜上皮細胞培養(yǎng)基 100mL

CDH8 Others Rat 大鼠 Cadherin-8 / CDH8 人細胞裂解液 (陽性對照) 小鼠白介素27(IL27)ELISA試劑盒 5HT4 Receptor： 5-羥色胺受體4抗體 大鼠肝細胞瘤;H4-II-E-C3

JF-305細胞，人胰腺癌細胞 人皮膚癌細胞系,HS-1細胞 KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細胞瘤瘤株;G422 小鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒 5HT4 Receptor： 5-羥色胺受體4抗體 EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細胞裂解液 (陽性對照)

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HA Others H10N9 甲型流感 H10N9 (A/duck/HongKong/562/1979) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠重肽神經(jīng)絲蛋白(NEFH)ELISA試劑盒 Monkey IgG/Cy3 熒光素Cy3標記猴IgG 0.1ml

Phospho-LAT (Tyr200)： 0酸化T細胞活化連接蛋白抗體 豚鼠皮膚細胞;GP-S3

Raji人Butt's淋巴瘤細胞 Raji human Butt's lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因KISS1蛋白(KISS1/Kisspeptin 1)ELISA試劑盒 Monkey IgM/Cy3 熒光素Cy3標記猴IgM 0.1ml

LRP1/CD91： 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1抗體 SERPINA7 Others Human 人 SerpinA7 / TBG 人細胞裂解液 (陽性對照)

Lenti-X293T人腎上皮細胞系GPR85： G蛋白偶聯(lián)受體GPR85蛋白抗體 家貓腎細胞;CATK1 肝細胞，HL-7702細胞 MMQ細胞，大鼠垂體瘤細胞

IGFBP4 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP4 人細胞裂解液 (陽性對照) 人狂犬病抗體(RV-Ab)ELISA試劑盒 Caspase-3 (CPP32) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-3(抗原) 0.5mg

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Hat-78細胞，人T細胞淋巴瘤 小鼠腎癌細胞,Ranca細胞 人食道平滑肌細胞cDNAHESMC cDNA 人狂犬病毒抗原ELISA試劑盒 Caspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原) 0.5mg

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