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兔色素上皮衍生因子(PEDF)elisa試劑盒操作步驟

閱讀:430      發布時間:2023-3-15
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兔色素上皮衍生因子(PEDF)elisa試劑盒操作步驟:


1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。

 蟲草素 英文名稱:CordycepsCAS號:73-03-0分子式:251.24

 補骨脂酚英文名稱:BakuchiolCAS號:10309-37-2分子式:256.38

 補骨脂二氫黃酮甲醚英文名稱:Buguzhi two hydrogen flavone etherCAS號:分子式:338.397

 補骨脂二氫黃酮英文名稱:Psoralen two flavanonesCAS號:分子式:

 補骨脂定英文名稱:PsoralidinCAS號:18642-23-4分子式:

 龍腦英文名稱:BorneolCAS號:507-70-0分子式:154.25

 表沒食子兒茶素英文名稱:EpigallocatechinCAS號:970-74-1分子式:306.27

表白樺脂酸英文名稱:Betulinic acid.CAS號:38736-77-5分子式:

 百秋里醇英文名稱:Patchouli alcoholCAS號:分子式:

 1,8-桉葉素英文名稱:1,8- EucalyptusCAS號:470-82-6分子式:154.25

 雷公藤內酯甲英文名稱:, aCAS號:84104-71-2分子式:454.68

 13-乙酰基-9-羥基巴卡丁III英文名稱:13- acetyl -9- hydroxy Chiba kart IIICAS號:142203-65-4分子式:630.67938

 亞麻木酚素英文名稱:Flax phenolCAS號:148244-82-0分子式:686.71

 延胡索乙素英文名稱:TetrahydropalmatineCAS號:2934-97-6分子式:355.4275


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