詳細介紹
簡便·快捷的總蛋白定量檢測試劑盒
蛋白質快速測定試劑盒Wako II
本試劑盒可檢測樣品中的總蛋白。
現在,多數蛋白質定量測定法會對試管、玻璃容器等造成污染。
本試劑盒使用以鄰苯三酚紅(PR)為色素的比色法作為基本原理進行開發的。顯色液操作簡單,幾乎不會對實驗器皿造成污染。
◆特點
● 一步定量
● 顯色液不需稀釋
● 反應時間只需30分鐘
● 顯色器皿污染小
◆測定原理
鄰苯三酚紅(PR)與鉬酸結合,在470 nm處形成大吸收波長的紅色絡合物。該絡合物在酸性條件下與蛋白質結合,使波長發生移位,同時使試液呈現出藍紫色。通過測定600nm附近的吸光度,對試劑中總蛋白的濃度進行測定。 |
◆操作概要【細胞法(cell method)】
1. 將50 μL樣品及3.0 mL顯色液充分混合*) |
試劑盒構成
● 顯色液:310 mL×1支 ● BSA標準溶液(2 mg/mL):5mL×1支 | 檢測范圍
● 細胞法(cell method):62.5~2,000 μg/mL ● 微量滴定板法:125~2,000 μg/mL |
◆標準曲線例【細胞法】
共存物質影響
共存物質對樣品BSA(濃度500 μg/mL)的影響為無添加的吸光度的±10%以內。
化合物 | 共存容許濃度 | 化合物 | 共存容許濃度 |
硫酸銨 | 0.8 mol/L | 2-巰基.乙醇 | 0.5 mol/L |
二硫蘇糖醇 | 0.5 mol/L | MES | 0.7 mol/L |
乙二胺四乙酸(EDTA) | 0.4 mol/L | MOPS | 0.2 mol/L |
乙二醇雙(2-氨基乙.醚)四乙酸(EGTA) | 0.04 mol/L | 氯化鈉 | 4 mol/L |
果糖 | 0.1 mg/mL | 氫氧化鈉 | 0.02 mol/L |
葡萄糖 | 0.1 mg/mL | 磷酸二氫鈉 | 1 mol/L |
谷胱甘肽(還原) | 0.5 mg/mL | 哌.嗪-1,4-二乙磺酸 | 0.5 mol/L |
甘油 | 50 v/v% | SDS *) | 0.01 w/v/% |
甘氨酸 | 0.1 mol/L | 疊氮.化鈉 | 0.2 w/v% |
鹽酸胍 | 0.1 mol/L | 蔗糖 | 40 w/v% |
4-羥乙基哌.嗪乙磺酸(HEPES) | 0.1 mol/L | 聚乙二醇辛基苯基醚 | 0.07 w/v% |
鹽酸 | 1 mol/L | 三羥甲基氨基甲烷 | 2 mol/L |
氯.化鉀 | 1 mol/L | 非離子活性劑20 | 0.1 mol/L |
六水氯化鎂(MgCl2?6H2O) | 1 mol/L | 尿素 | 6 mol/L |
*)本試劑盒易受SDS影響,此外校準曲線僅能夠在SDS 濃度0.01%,BSA濃度250~2,000μg/mL的條件下制作,請注意避免增加SDS的用量。
◆產品列表
產品編號 | 產品名稱 | 規格 |
295-78401 | 蛋白質快速測定試劑盒Wako II | 100次 |