詳細介紹
硅膠珠型microRNA分離試劑盒
富士膠片和光提供能使從Ago 免疫沉淀到RNA 提取等一系列實驗操作簡化的“microRNA純化試劑盒”系列。使用本系列試劑盒能簡便地從人和小鼠的細胞或組織中提取Ago蛋白結合的microRNA以及靶mRNA,還能從培養上清、血清、血漿中提取游離Ago蛋白結合的microRNA。所提取到的RNA可以應用于qPCR、微陣列檢測、NGS等下游實驗。本系列包括采用磁珠的MagCapture™ microRNA純化試劑盒,以及采用了硅膠珠法的microRNA純化試劑盒。
microRNA純化試劑盒抗Ago抗體固定珠子具有非特異吸附性低的特征,它采用二氧化硅基聚合物珠粒,以離心為基礎進行免疫沉淀操作。在從免疫沉淀后的硅膠珠中提取RNA的步驟時,采用苯酚/CHCl3提取(P/C法)及乙醇沉淀來提取RNA。富士膠片和光推出含有固定了抗Ago1抗體(2A7)、抗人Ago2抗體(4G8)、抗小鼠Ago2抗體(2D4)、抗人Ago3抗體(1C12)的硅膠珠的4種試劑盒。
◆操作示意圖
◆試劑盒使用實例
用microRNA純化試劑盒,人Ago2通過Urea-PAGE分離從三種5×106 cells的人培養細胞株(HeLa、HepG2、HEK293),和小鼠培養細胞株(P388D1)中提取的microRNA組分,再進行銀染(311-03961、CLEAR STAINAg、20 tests)檢測。結果表明能從人培養細胞中特異性提取microRNA(圖1)。以同樣的銀染試劑,檢測用microRNA純化試劑盒,小鼠Ago2從5×106 cells的人培養細胞(HeLa)和嚙齒動物培養細胞株(P388D1、CHO、PC-12)中提取的microRNA組分。結果表明,能從三種嚙齒動物培養細胞株中特異性提取microRNA而不能從人細胞株中提取(圖2)。
圖1.通過用人Ago2提取的microRNA的進行銀染檢測
圖2. 對小鼠Ago2提取的microRNA的進行銀染檢測
◆產品列表
產品編號 | 產品名稱 | 使用抗體克隆號 | 對應 物種 | 對應樣本 | 提取RNA | IP B/F | RNA提取法 |
291-70201 | microRNA純化試劑盒,人/鼠Ago1 | 2A7 | 人、小鼠 | 細胞/組織 | microRNA | 離心 | P/C 法 |
292-66701 | microRNA純化試劑盒,人Ago2 | 4G8 | 人、猴、狗 | ||||
292-67301 | microRNA純化試劑盒,小鼠Ago2 | 2D4 | 小鼠、 | ||||
297-70301 | microRNA純化試劑盒,人Ago3 | 1C12 | 人 |
硅膠珠型microRNA分離試劑盒