線粒體呼吸鏈復合體Ⅴ活性測試盒-可見分光光度法

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參數規格：

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產品資料：

試劑一：25mL×1 瓶，-20℃保存； 試劑二：25mL×1 瓶，-20℃保存； 試劑三：1 mL×1 瓶，-20℃保存； 試劑四：粉劑×1 支，-20℃保存；臨用前每支加入1.3mL 蒸餾水，充分溶解備用，用不完的 試劑仍-20℃保存; 試劑五：6mL×1 瓶，4℃保存； 試劑六：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入3mL 蒸餾水，充分混勻; 試劑七：粉劑×1 瓶, 4℃保存；臨用前加入10mL 蒸餾水，充分混勻; 試劑八：粉劑×1 瓶, 4℃保存；臨用前加入10mL 蒸餾水，充分混勻; 試劑九：液體10mL×1 瓶，室溫保存。 定磷試劑的配制：按H2O: 試劑七:試劑八:試劑九=2:1:1:1 的比例配制，配好的定磷試劑應 為淺黃色。若無色則試劑失效，若是藍色則為磷污染（請根據需要，用多少配多少）。 注意：配試劑用新的燒杯、玻棒和玻璃移液器，或者一次性塑料器皿，以避免磷污染。

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工作原理：織及血液堿性磷酸酶（AKP/ALP）測試盒-可見分光光度法
復合體Ⅴ水解ATP 產生ADP 和Pi，通過測定Pi 增加速率來測定復合體Ⅴ活性。
測定意義：
線粒體復合體Ⅴ又稱F1F0-ATP合酶，廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞的線粒體中，由F1和F0兩個亞單位組成。該酶利用呼吸鏈產生的質子電化學梯度催化ATP合成，也可逆過程水解ATP。此外，復合體Ⅴ還存在于葉綠體、異養菌和光合細菌中。復合體Ⅴ是線粒體氧化磷酸化和葉綠體光合磷酸化合成ATP的關鍵酶。
標本處理：
組織、細菌或細胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離：
1 準確稱取0.1g 組織或收集500 萬細胞，加入1mL 試劑一和10uL 試劑三，用冰浴勻漿器或研缽勻漿。
2 將勻漿600g，4℃離心5min。
3 棄沉淀，將上清液移至另一離心管中，11100g，4℃離心10min。
4 上清液即為除去線粒體的胞漿蛋白，可用于測定從線粒體泄漏的復合體Ⅴ（此步可選做）。
5 步驟④中的沉淀即為線粒體，加入800uL 試劑二和8uL 試劑三，超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10 秒，重復30 次），用于復合體Ⅴ酶活性測定。
訂購流程：
    1、報價含普票、運費。
    2、常用試劑備貨充足，除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發貨。
    3、進口原裝產品要3-6周的貨期，詳細情況請咨詢客服。
    4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。
    5、如需代為檢測，標本對環境溫度高，可客服安排專人取樣（限省內客戶）。
    6、代測免收代測費，一周出結果。
    7、產品因運輸途中包裝破損請拒絕簽收，做退回。我們將在24小時之內為您補發損壞產品
    8、如因單位財務制度原因，可申請先發貨，報賬后付款（此條款僅限醫院、學校信譽良好
          客戶）。
注意事項：
影響顯色反應的主要因素有哪些？
影響顯色反應的主要因素有顯色劑的用量、溶液的酸度、顯色時間以及干擾離子等。
為了使測定結果有較高的靈敏度和準確度，如何選擇zui適宜的測量條件？
一般從以下幾個方面來考慮：
①選擇適當的測量波長。一般根據待測組分的吸收光譜選擇zui大吸收波長作為測量波長。如果干擾組分在zui大吸收波長也有吸收,則應根據：吸收大，干擾小"的原則來選擇測量波長
②調價溶液的濃度，或選用不同厚度的吸收池，控制被測是呀的吸光度在0.2-0.8范圍內。
③選擇適當的參比溶液。
在分析復雜樣品時，如何消除干擾？
消除干擾方法主要有：
1、加入眼筆記，如加入配位掩蔽劑，使其與干擾離子生成測定波長物吸收的配合物，如加入氧化還原掩蔽劑，改變干擾離子的價態。
2、選擇適宜的顯色條件，如控制溶液的酸度等，使干擾離子與顯色劑不發生反應。3、采用雙波長或其他選擇性的方法；
4、分離干擾離子。
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