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乙酰輔酶A測試盒
參數規格:
編號 | 產品名稱 | 檢測方法 | 規格 |
KY116 | 乙酰輔酶A測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 |
產品資料:
試劑一:液體 100mL×1瓶,4℃保存。 試劑二:粉劑×1支,-20℃保存。臨用前加入 250μL試劑五充分溶解備用。 試劑三:液體×1支,4℃保存。臨用前加入 250μL試劑五充分溶解備用。 試劑四:粉劑×1瓶,-20℃保存。臨用前加入 22.5mL試劑五充分溶解備用。 試劑五:液體 30mL×1瓶,4℃保存。 工作液的配制:臨用前請根據擬用工作液體積(樣本數× 0.23 m L),將試劑二、三和四按照 1:1:90的比例混合,或者直接把試劑二和試劑三加入到試劑四中混勻(可以測定 96樣);加樣前置 37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)水浴鍋中預熱 30 min。 | 電子名片 |
工作原理:
蘋果酸脫氫酶可催化蘋果酸和 NAD生成草酰乙酸和 NADH。檸檬酸合酶可催化乙酰輔酶 A和草酰乙酸生成檸檬酸和輔酶 A。利用蘋果酸脫氫酶和檸檬酸合酶的偶聯反應,乙酰輔酶 A含量和 NADH的生成速率成正比,340nm下吸光值的上升速率反應了乙酰輔酶 A含量的高低。
測定意義:
乙酰輔酶 A廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中。是生物體能源物質代謝過程中產生的一種重要的中間代謝產物。在體內能源物質代謝中是一個樞紐性的物質。糖、脂肪、蛋白質三大營養物質通過乙酰輔酶 A匯聚成一條共同的代謝通路 -三羧酸循環和氧化磷酸化,經過這條通路*氧化生成二氧化碳和水,釋放能量用于 ATP合成。此外,乙酰輔酶A是合成脂肪酸,酮體,膽固醇及其衍生物等生理活性物質的前體物質。
標本處理:
1、細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(10個):試劑一體積(mL)為 500~1000:1的比例(建議 500萬細菌或細胞加入 1mL試4劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g組織,加入 1mL試劑一),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
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其他規格產品:NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)測試盒
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合作單位:NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)測試盒
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