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當(dāng)前位置:青島捷世康生物科技有限公司>>染液>>溶液>> 100ml快流速Q(mào)瓊脂糖凝膠
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產(chǎn)品型號(hào)100ml
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地青島市
更新時(shí)間:2024-11-10 07:17:31瀏覽次數(shù):1631次
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基本信息
產(chǎn)品名稱:快流速Q(mào)瓊脂糖凝膠
規(guī)格:100ml
介紹:
一、簡(jiǎn)介
是將三基烷基季銨基團(tuán)鍵合在高流速瓊脂糖微球上形成的一種強(qiáng)陰離子交換介質(zhì)。廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備。
本品為白色球狀凝膠,無(wú)嗅、無(wú)味、無(wú)肉眼可見(jiàn)雜質(zhì)。
二、親和填料特性
*檢測(cè)條件: 層析柱10mm×300mm *柱床高15cm,25℃,流動(dòng)相為0.1mol/LNaCl。.
三、 適用范圍
本產(chǎn)品具有高化學(xué)穩(wěn)定性、高流速、高載量、好的機(jī)械性能、可在位清洗、多次重復(fù)使用等特點(diǎn),非特異性吸附低,回收率高,適用于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn),適用于在pH工作范圍內(nèi)可形成負(fù)離子的生物大分子的分離純化,廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備。
四、操作說(shuō)明
1 裝柱
(1)讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫。配制初始緩沖液(平衡液)和洗脫緩沖液。
(2)根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠,清洗掉20%乙醇,抽干,用初始緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。
(3)將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務(wù)必使底端無(wú)氣泡。
(4)用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開(kāi)柱子出液口,使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,連結(jié)好柱子頂端柱頭。
(5)打開(kāi)蠕動(dòng)泵,讓緩沖液用使用時(shí)流速的1.33倍的流速流過(guò),使柱床穩(wěn)定。用2~3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。
2 平衡
讓平衡緩沖液以一定流速流過(guò)柱子,到流出液電導(dǎo)和pH不變。平衡液是低濃度的緩沖溶液,如Tris、PBS等。
3 上樣
(1)樣品用平衡液配制,渾濁的樣品要離心和過(guò)濾后上樣。鹽濃度太大的樣品處理后再配。
(2)一般情況是讓目標(biāo)產(chǎn)品結(jié)合在柱子上,用平衡液洗去雜質(zhì),再選擇一種洗脫液洗下目標(biāo)產(chǎn)品。
(3)介質(zhì)對(duì)樣品組分吸附的程度取決于樣品的帶電性質(zhì)、流動(dòng)相的離子強(qiáng)度和pH值。鹽濃度小,介質(zhì)對(duì)樣品組分吸附較牢。用DEAE介質(zhì)時(shí),推薦的pH值是小于目標(biāo)產(chǎn)品等電點(diǎn)1個(gè)單位。
4 洗脫
Q瓊脂糖凝膠FF介質(zhì)可用增大鹽濃度或減小pH值進(jìn)行洗脫,常用增大鹽濃度的辦法洗脫。
5再生
一般用高鹽濃度的緩沖液(含1~2mol/L NaCl)洗或減小pH洗10倍以上柱體積,接著用結(jié)合蛋白的平衡液洗到平衡,可再次使用。
若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時(shí)洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。
6 在位清洗
(1)對(duì)于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白,可以用2M NaCl去除。
(2)對(duì)沉淀蛋白、對(duì)以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類,可用1M NaOH 去除。
(3)對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等,用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗,但要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,否則容易產(chǎn)生氣泡。
清洗完畢后,用至少3倍緩沖液平衡柱子。
7 注意
在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候,要避免柱子流干,氣泡進(jìn)入。
在使用過(guò)程中,不能使用強(qiáng)酸,如使用酸洗,應(yīng)使用濃度低于0.1 M的冰醋酸。
8 去熱源
用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時(shí)或用0.1M的氫氧化鈉24小時(shí)。或用以下方法步驟去除:
(1)2倍柱體積的70%乙醇;
(2)2倍柱體積50mM Tris-HCl pH7.5;
(3)1倍柱體積4M尿素;
(4)3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M NaCl;
以上緩沖液都在無(wú)熱源的雙蒸水中配制。
9 消毒
用0.5~1M NaOH室溫下洗8~10倍柱體積,初始緩沖液平衡柱子。
10 滅菌
置介質(zhì)于高壓滅菌鍋中120℃下30分鐘。
五、快流速Q(mào)瓊脂糖凝膠注意事項(xiàng)
產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20% 乙醇),通風(fēng)、干燥、清潔的地方。不能冷凍。用過(guò)的柱子貯存在4℃(20% 乙醇)。避免與氧化劑接觸;避免在pH< 4的環(huán)境中長(zhǎng)時(shí)間暴露(一周,20℃)。
三 產(chǎn)品訂購(gòu)說(shuō)明:
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
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