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當(dāng)前位置:青島捷世康生物科技有限公司>>公司動態(tài)>>改良油紅 O染色液
產(chǎn)品簡介:
脂質(zhì)(Lipid)是中性脂肪、類脂及其衍生物的總稱,其共同的物理特性是不溶于水,易溶于有機(jī)溶劑(如乙醇等)。人體的脂肪主要有兩種:1、儲存脂肪,如中性脂肪,主要分布于皮下、腎、胰腺等部位。2、結(jié)構(gòu)脂肪,如類脂(磷脂、糖脂、膽固醇等),主要分布于細(xì)胞內(nèi)。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油組成的脂類,呈中性。中性脂肪是儲存能量的方式之一,在氧化時(shí)釋放出能量。中性脂肪染色經(jīng)常采用蘇丹Ⅱ、蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ、蘇丹黑、油紅O法等。傳統(tǒng)方法采用蘇丹染料,zui近發(fā)現(xiàn)偶氮染料油紅O更適合脂肪的染色。油紅O是很強(qiáng)的脂溶劑和染脂劑,較易與甘油三脂結(jié)合呈小脂滴狀,
與磷脂結(jié)合力稍差。其染色原理一般認(rèn)為是物理上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂肪染色。染料在冰凍切片內(nèi)脂質(zhì)的溶解度較原溶劑中的溶解度更大,所以在染色時(shí)染料就從有機(jī)溶劑轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)而使脂肪染色。
改良油紅O染色液主要用于顯示組織器官的脂肪變性和類脂質(zhì)的異常沉著,常發(fā)生于肝、腎、心等實(shí)質(zhì)臟器的脂肪變性,細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)多數(shù)中性脂肪滴;鑒別和診斷脂肪組織中所發(fā)生的腫瘤及其性質(zhì)。標(biāo)本不采用含有乙醇的固定液(如需要固定可采用10%福爾馬林),樣本不采用石蠟切片,需用冰凍切片或碳蠟切片,脂肪的陽性染色結(jié)果呈橘黃至紅色,但具體顏色因脂質(zhì)濃度而定。
產(chǎn)品組成:
產(chǎn)品 | 規(guī)格
| 2×50ml | 2×100ml | 儲存 |
試劑(A):改良 Oil Red O Stain | A1: Oil Red O Stain A | 30ml | 60ml | 4℃,避光 |
A2: Oil Red O Stain B | 20ml | 40ml | 4℃ | |
充分搖勻A1、A2后,按A1、A2=3:2比例混合靜置10min, 即為改良Oil Red O Stain,不宜提前配制;如有條件盡量進(jìn)行過濾,以免色素沉淀,造成假陽性。 | ||||
試劑(): Mayer 蘇木素染色液 | 50ml | 100ml | 4℃,避光 | |
使用說明書 | 1份 |
自備材料:
1、60%異丙醇
2、蒸餾水
3、1%鹽酸溶液
操作步驟(僅供參考):
1、冰凍切片厚度6~10μm,不固定或10%福爾馬林固定10min后水洗。
2、入蒸餾水中稍沖洗。
3、 入60%異丙醇浸洗20~30s。
4、 入改良油紅O染色液(加蓋),密閉染色10~15min。
5、 分色: 入60%異丙醇稍洗以便去除染液。
6、 入蒸餾水稍微清洗。
7、 入 Mayer 蘇木素染色液,復(fù)染核1~2min。
8、 (可選)1%鹽酸溶液稍微分化一下。
9、 (可選)自來水漂洗10min或稀碳酸鋰溶液促藍(lán)。
10、 入蒸餾水稍微清洗。
11、 用濾紙吸干周圍水分。甘油明膠或阿拉伯糖膠封固。
染色結(jié)果:
中性脂肪 | 橙紅色或者橘紅色 |
細(xì)胞核 | 藍(lán)色 |
注意事項(xiàng):
1、改良油紅O染色液不夠穩(wěn)定,易產(chǎn)生沉淀,不宜提前配制。
2、如果60%的異丙醇不易獲得,亦可采用70%的乙醇。
3、由于脂肪易溶于有機(jī)溶劑,所以顯示脂肪一般不能像石蠟切片一樣處理,而通過冰凍切片染色來顯示。
4、作脂肪染色的冰凍切片不可太薄,過薄的切片常會使脂質(zhì)丟失。
5、Mayer蘇木素染色液復(fù)染時(shí)間不能過長。
6、染色結(jié)果不能長期保存,應(yīng)盡快觀察及照相。
7、甘油明膠封固的樣本,保存時(shí)間不長。如需長期保存,可以在蓋玻片與載玻片交界的邊緣用中性樹膠封閉。
有效期:12個(gè)月有效。
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