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NIGHTSEA產品應用二：預篩選樣本，輔助解剖
點擊次數：3517 發布時間：2014-10-27
美國nightsea致力于研究和開發熒光觀測裝備，其產品系列有DFP-1雙熒光蛋白手電筒系列，BLS2單熒光蛋白手電筒系列，SFA-RB體視顯微鏡熒光適配器。
熒光是各種各樣細胞生物學、神經系統學及其他領域研究中的一種強大和廣泛使用的工具。
nightsea的DFP-1,BLS2和SFA-RB除了可用于篩選轉基因生物外，還可以用于樣本的預篩選、輔助解剖、用于珊瑚研究等，下面就列舉一些實例：
1. 有時候，研究者們需要對小鼠的伏隔核進行穿孔，以便進一步生化分析。如果能觀測到共轉染的熒光，就能很容易找到正確的穿孔部位。研究者們就是用BLS2 Bluestar手電筒，來觀測熒光，從而找到正確穿孔位置的(文獻– Xuan Li and Marina E. Wolf, 2011. Visualization of virus-infected brain regions using a GFP-illuminating flashlight enables accurate and rapid dissection for biochemical analysis. J. of Neuroscience Methods, Vol. 201, Issue 1, pp. 177-179. LINK)
EGFP標記的慢病毒質粒注射進小鼠大腦區域（ Marina Wolf, Rosalind Franklin University）
2.研究者從小鼠大腦中提取GFP標記的背紋體。他們把這比喻成：從一個大一點的燕麥片中分離出一塊小的燕麥片，這是很困難的。但是他們用NIGHTSEA的DFP-1或BLS2（手電筒和眼鏡組合），他們很容易看到大腦中的目標區域，從而讓解剖更準確。
小鼠大腦中GFP標記的背紋體（Charles Mazel. Sample photographed at laboratory of Stefano Vicini, Georgetown University）
3.用DFP-1雙熒光蛋白手電筒，BLS2單熒光蛋白手電筒，或SFA-RB體視顯微鏡熒光適配器，可以很快的檢測樣本是否染色（Alexa Fluor 488 Phalloidin標記）成功，如下圖：
兔腰肌的肌纖維（用Alexa Fluor 488 Phalloidin標記）
左圖：白光觀測 右圖：Royal Blue熒光觀測（Motic SMZ-186體視顯微鏡觀測）
4.用SFA-RB體視顯微鏡熒光適配器以斑馬魚為模型，觀測不同毒劑（醫藥、農藥、食品添加劑等）改變大腦的發育。觀測圖片如下：
基因斑馬魚大腦共聚焦圖像
Kaede protein– 綠色是未改變的，紅色是改變了的
Robert Thorn（Creton Lab, 布朗大學）提供
5. 熒光是珊瑚采集研究的重要工具。現在，可以用經濟又實惠的SFA-RB體視顯微鏡熒光適配器安裝到體視顯微鏡檢測珊瑚。
下面的圖片是通過立體顯微鏡觀看珊瑚蟲。這是由Alina Szmant 博士(UNCW威爾明頓納大學)與NIGHTSEA的Charles Mazel共同觀測的結果
6.用于結核分枝桿菌重組株的篩選
在結核分枝桿菌中成功構建了同源重組系統,利用該系統構建了rv1364c、pstP跨膜區、pstP胞外區三個突變株,得到雙交換突變株的效率為25％ -62.5％,從雙交換突變株得到無痕缺失突變株的效率為100％.通過gfp作為熒光標記基因,利用NightSea BlueStar藍光手電筒和濾光眼鏡,可以對平板上的基因缺失株直接進行快速判定.
本研究采用nightsea BLS2 BlueStar 藍色手電筒和濾光鏡對平板上的結核分枝桿菌綠色熒光蛋白菌落進行快速鑒定。該方法可以從幾百個菌落中瞬間鎖定陽性克隆。平板上的菌落照片拍攝用單反相機加載濾光片（購自nightsea公司）實現。
摘自文章[結核分枝桿菌同源重組基因敲除系統的構建和應用]