淺析生物磁珠分離技術原理
生物磁珠分離技術借助生物磁珠捕獲樣品中靶物質,通過生物磁珠在磁場中的運動使靶物質(如病原微生物)分離。生物磁珠由磁性載體和免疫配基結合而成。天然磁性材料可從磁性細菌中分離獲得,如從磁性細菌體內提取納米生物磁珠,在其表面聯上大腸桿菌抗體后用于分離大腸桿菌,但該方法成本較高,因而多采用工業方法制備。1979年,研發出了能生產直徑1.5~100?m、結構對稱的多聚體超順磁性微球(簡稱“磁珠”)的技術。該技術生產的磁珠僅在磁場中表現出磁性,因此向樣品中加入磁珠時,磁珠分散并能與樣品充分混合;當在試管一側添加強磁場時,生物磁珠能迅速發生力學遷移并吸附在靠近磁場的試管內壁,移除樣品后即可將磁珠分離。
免疫配基包被于磁珠外表面,主要包括一抗、二抗和蛋白質A/G。包被一抗的生物磁珠可直接使用,方便快捷,但僅適用于特定靶物質的分離;包被二抗或蛋白質的生物磁珠必須再包被一抗才能捕獲相應靶物質,但其能與多種相應的一抗結合,靈活性強。
生物磁珠表面的特異抗體能與樣品中的靶物質(具有相應的表面抗原)發生免疫反應,形成生物磁珠—靶物質復合物。在外加磁場中,生物磁珠 一靶物質復合物被吸附并滯留在磁場中,而無相應表面抗原的物質由于不能與生物磁珠表面的特異抗體結合,沒有磁性,不能在磁場中停留,從而可分離靶物質。