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血清中非甾體類消炎藥檢測的快速萃取方法

時間:2017-5-4閱讀:540
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血清中非甾體類消炎藥檢測的快速萃取方法

(SuperClean SLE)

一、實驗目的
應用SuperClean SLE液-液萃取柱快速提取血清中非甾體類消炎藥。

二、實驗目標物
舒林酸(CAS:38194-50-2)

三、實驗材料
NuAnalytical SuperClean SLE液-液萃取柱1 mL。

四、實驗方法
1、 樣品預處理
將血清樣品用1%的甲酸(1:1,v/v)稀釋并混勻,使樣品zui終的pH在3.2左右。取一部分空白血清備用;剩下的空白血清加入一定體積的舒林酸儲備液,配制成濃度為0.7 mg/L的舒林酸加標血清。

2、上樣
向SLE柱中加入1 mL預處理的樣品,加負壓啟動流速(5-15秒),然后讓樣品吸附于填料中約5分鐘。

3、 洗脫
向柱中加入4 mL甲基叔丁基醚。使溶劑通過重力流出并收集洗脫液,然后再向柱中加入4 mL的甲基叔丁基醚。在收集結束后加適當的正力或負壓(-15" Hg)2分鐘并收集zui終洗脫出的溶劑。

4、濃縮
將上述收集的提取液于35℃左右的溫度低真空下濃縮,再用緩氮氣流祛除乙溶液, 使其濃縮至近干。取1 mL甲醇-水(40:60,v/v)定容,過0.22 µm濾膜,供HPLC測定。

5、HPLC條件
色譜柱:SuperLu C18 (250×4.6mm,5μm)
檢測器:UV@268 nm  
流動相:A: 乙腈  B:0.1%甲酸水溶液
柱溫:室溫             
流速:1.0mL/min            
進樣量:20μL
洗脫方式:等度洗脫,A:B=50:50


五、實驗結果

1、血清中0.7 mg/L舒林酸加標回收結果

表1   血清中0.7 mg/L舒林酸加標回收結果

 

名稱

保留時間/min

平均回收率/%

舒林酸

5.86

89.94

 

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