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關(guān)鍵詞:SILAC實(shí)驗(yàn)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
簡介:世界*品牌SILAC實(shí)驗(yàn)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)原裝,質(zhì)量保證,*。
SILAC實(shí)驗(yàn)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系。
我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計(jì)經(jīng)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)操作技巧,承諾客戶不成功不收費(fèi)。在獲得重組蛋白產(chǎn)品的同時(shí),我們也會(huì)提供相應(yīng)的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費(fèi)精力重復(fù)實(shí)驗(yàn)。另一方面,我們所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可信,我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒,客戶可以依據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)報(bào)告重復(fù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
產(chǎn)品品牌: http://www.。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程:
SILAC即細(xì)胞培養(yǎng)條件下穩(wěn)定同位素標(biāo)記技術(shù)(Stable isotope labeling with amino acids in cell culture,SILAC),其基本原理是分別采用含有輕、中或重型同位素必需氨基酸的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞(用于SILAC的穩(wěn)定同位素氨基酸主要有Lys和Arg),新合成的蛋白質(zhì)即嵌合了同位素氨基酸,如此培養(yǎng)5-6代后,細(xì)胞的所有蛋白質(zhì)均被同位素標(biāo)記上。經(jīng)處理因素刺激后,等量混合各類型蛋白質(zhì),然后經(jīng)SDS-PAGE分離和質(zhì)譜分析,通過比較一級(jí)質(zhì)譜圖中同位素峰型的面積大小進(jìn)行相對(duì)定量,同時(shí)二級(jí)譜圖對(duì)肽段進(jìn)行序列測(cè)定從而鑒定蛋白質(zhì)。
由于SILAC標(biāo)記技術(shù)是體內(nèi)標(biāo)記技術(shù),幾乎不影響細(xì)胞的功能,同時(shí)靈敏度高,因此其在蛋白質(zhì)組學(xué)相關(guān)領(lǐng)域中得到了廣泛的應(yīng)用,如比較蛋白質(zhì)組學(xué),蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用,蛋白質(zhì)與DNA相互作用,蛋白質(zhì)與RNA相互作用等領(lǐng)域。
與體外標(biāo)記技術(shù)相比,SILAC屬于體內(nèi)標(biāo)記,具有以下技術(shù)優(yōu)勢(shì)
1、高通量,可同時(shí)鑒定并定量數(shù)百至數(shù)千種蛋白質(zhì);
2、定量,降低由于樣品制備不同而造成的實(shí)驗(yàn)差異;
3、線性定量范圍廣;
4、靈敏度更高,蛋白質(zhì)需要量明顯減少;
5、標(biāo)記采用的是體內(nèi)標(biāo)記技術(shù),更接近樣品真實(shí)狀態(tài)。
SILAC技術(shù)服務(wù)內(nèi)容
1、細(xì)胞同位素標(biāo)記;
3、SDS-PAGE分離;
4、胰酶酶切后液相分離和質(zhì)譜分析;
5、數(shù)據(jù)庫檢索及蛋白質(zhì)定量分析;
6、差異蛋白的生物信息學(xué)分析
7、實(shí)驗(yàn)報(bào)告提交。
實(shí)驗(yàn)服務(wù)報(bào)告內(nèi)容
1、蛋白定鑒定和SILAC定量分析結(jié)果;
2 、顧客蛋白質(zhì)對(duì)應(yīng)的質(zhì)譜峰圖;
3、SILAC實(shí)驗(yàn)完整的實(shí)驗(yàn)步驟、使用儀器、軟件檢索參數(shù)等。
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