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CAS | 65455-52-9 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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規(guī)格 | 100ml | 貨號 | P8370 |
應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),石油 | 主要用途 | 適合分離細胞 |
Percoll細胞分離液
貨號:P8370
規(guī)格:100ml
儲存條件 : 2-8℃
外觀(性狀) : 淡黃色液體;
密度:1.13g/ml
單位 : 瓶
商品貨號: | 商品品牌: | 規(guī)格 | 基本售價: | 選擇規(guī)格 |
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P8370-100ml | Solarbio | 100ml | 600.00元 |
1、不同濃度(密度)Percoll分離液的制備: 先用9份Percoll分離液與1份8.5% NaCl或1.5MPBS混合達到生理性滲透壓,然后用生理溶液(0.85% NaCl或0.15M PBS)稀釋到所需濃度。
2、不連續(xù)密度梯度Percoll層的制備: 先將試管壁用牛血清濕潤,除去多余血清,這種預處理可使逐層疊加的Percoll液平穩(wěn)沿管壁流下,使形成滿意的界面。在制備過程中一般用長針頭注射器從高密度向低密度逐層放置,有時相鄰兩層Percoll比重相差不大時,可將Percoll液放入注射器中,小針頭斜面緊貼管壁,任其自然慢慢流下。
3、裝樣:樣品體積和細胞濃度根據(jù)不同細胞而異,一般加樣體積不宜過大,細胞濃度也不可過高,否則會影響細胞的分離和回收。
4、離心:一般采用離心力為400g,時間20~25min。由于多層Percoll之間密度差別不大,因此離心機加速、降速時要慢,要平穩(wěn)。
5、取樣:當所要分離的細胞絕大部分在兩層的界面時,可逐層去除Percoll液后收集界面部位的細胞;有時大部分細胞位于Percoll層中,則需要逐層收集。收獲含有Percoll液的細胞經2次洗滌后可供培養(yǎng)或檢測用。
適合分離細胞,亞細胞成分和大病毒(>70S),滲透壓均勻,粘度低,可調生理離子強度和pH,分離條件溫和,對細胞無毒性,可以滅菌消毒。
Percoll分離液是一種經過聚乙烯吡咯烷酮處理過的硅膠顆粒,經過高速離心后可形成連續(xù)密度梯度,由于Percoll擴散常數(shù)低,所形成的梯度十分穩(wěn)定。Percoll分離液采用預先形成的密度梯度時可在低離心力(200~1000g)于數(shù)分數(shù)十分鐘內達到滿意的細胞分離結果。此外,Percoll分離液不穿透生物膜,對細胞無毒害,因此廣泛用于分離細胞、亞細胞成分、細菌及病毒,還可將受損細胞及其碎片與完好的活細胞分離。Percoll常用于分離和傳話植物原生質體、核、葉綠體、和線粒體。
Percoll細胞分離液
Percoll滲透性低、不穿透細胞、密度高、無毒害,是目前較理想的介質。Percoll密度梯度離心已被多次成功地用于動物細胞及其細胞器的分離,純化了包括人血液細胞、骨髓細胞、紅血球細胞、白血球細胞、淋巴細胞、肝細胞等在內的十余種動物細胞。
1、不同濃度(密度)Percoll分離液的制備: 先用9份Percoll分離液與1份8.5% NaCl混合達到生理性滲透壓,然后用生理溶液(0.85% NaCl)稀釋到所需濃度。
2、不連續(xù)密度梯度Percoll層的制備: 先將試管壁用牛血清濕潤,除去多余血清,這種預處理可使逐層疊加的Percoll液平穩(wěn)沿管壁流下,使形成滿意的界面。在制備過程中一般用長針頭注射器從高密度向低密度逐層放置,有時相鄰兩層Percoll比重相差不大時,可將Percoll液放入注射器中,小針頭斜面緊貼管壁,任其自然慢慢流下。
3、裝樣:樣品體積和細胞濃度根據(jù)不同細胞而異,一般加樣體積不宜過大,細胞濃度也不可過高,否則會影響細胞的分離和回收。
4、離心:一般采用離心力為400g,時間20~25min。由于多層Percoll之間密度差別不大,因此離心機加速、降速時要慢,要平穩(wěn)。
5、取樣:當所要分離的細胞絕大部分在兩層的界面時,可逐層去除Percoll液后收集界面部位的細胞;有時大部分細胞位于Percoll層中,則需要逐層收集。收獲含有Percoll液的細胞經2次洗滌后可供培養(yǎng)或檢測用。
優(yōu)點:
Percoll滲透性低、不穿透細胞、密度高、無毒害,是目前較理想的介質。Percoll密度梯度離心已被多次成功地用于動物細胞及其細胞器的分離,純化了包括人血液細胞、骨髓細胞、紅血球細胞、白血球細胞、淋巴細胞、肝細胞等在內的十余種動物細胞。
注意事項:
1、在儲存及孵育過程中避免將實際保留在強光中。
2、試劑瓶蓋需蓋緊,防止蒸發(fā)和污染。
北京索萊寶科技有限公司生產銷售貨號為P8370。適合分離細胞、亞細胞成分和大病毒(>70s),滲透壓均勻,粘度低,可調生理離子強度和pH,分離條件溫和,對細胞無毒性,可以滅菌消毒。密度為1.13g/ml。
參考文獻:
《Assessing Autophagy in the Leydig Cells》 作者:Hui Gao,Chao Liu,Wei Li 期刊:Autophagy in Differentiation and Tissue Maintenance 影響因子: PMID:
《Traditional Herbal Medicine-Derived Sulforaphene LFS-01 Reverses Colitis in Mice by Selectively Altering the Gut Microbiota and Promoting Intestinal Gamma-Delta T Cells》 作者:Ming Li, Jiali Gao, Yan Tang, Meishuo Liu, Sijin Wu, Kunli Qu, Xiangyu Long, Huajun Li, Min Li, Yinhui Liu, Jieli Yuan, Lei Mao, Yu Liu, Xiliang Zheng, Erkang Wang, Jin Wang and Yongliang Yang 期刊:Frontiers in Spotlight 影響因子:4.259 PMID:29375374
《Adenovirus?mediated knockdown of activin A receptor type 2A attenuates immune?induced hepatic fibrosis in mice and inhibits interleukin?17?induced activation of primary hepatic stellate cells》 作者:Hongjun Zhang,Baoling Ju,Ying Nie,Baohui Song,Yuanhong Xu,Ping Gao 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影響因子:2.784 PMID:
《Overexpression of heme oxygenase‐1 in microenvironment mediates vincristine resistance of B‐cell acute lymphoblastic leukemia by promoting vascular endothelial growth factor secretion》 作者:Kunlin Yu Jishi Wang Tingting Lu Dan Ma Danna Wei Yongling Guo Bingqin Cheng Weili Wang Qin Fang 期刊:J. Cell. Biochem. 影響因子:3.448 PMID:31264739