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北京索萊寶自產(chǎn) 免疫組化試劑 EDTA抗原修復(fù)液(1×)
貨號:C1033
規(guī)格:100ml/500ml
保存:室溫密封保存,有效期 12 個月。
產(chǎn)品說明 :
細(xì)胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后,會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)抗原形成醛鍵、羧甲鍵而被封閉了部分抗原決定簇,同時蛋白之間發(fā)生交聯(lián)而使抗原決定簇隱蔽,導(dǎo)致免疫染色時染色信號減弱,甚出現(xiàn)一些假陰性染色結(jié)果。所以要求在進(jìn)行免疫組化染色時,需要行抗原修復(fù)或暴露,即將固定時分子之間所形成的交聯(lián)破壞,而恢復(fù)抗原的原有空間形態(tài)。從而提高抗原的檢出率,降低背景染色,提高檢測的準(zhǔn)確性。
EDTA 抗原修復(fù)液(EDTA Antigen Retrieval solution,1×)是一種常用的抗原修復(fù)液,可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復(fù)。可以有效去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián),充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。
通常石蠟切片都需進(jìn)行抗原修復(fù)處理,而冰凍切片可以不進(jìn)行抗原修復(fù)處理。抗原修復(fù)可以提高石蠟切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰凍切片的染色效果。當(dāng)冰凍切片免疫染色效果不理想時,考慮進(jìn)行抗原修復(fù)。
按照每個片子需要 10ml 抗原修復(fù)液(1×)計算,100ml 抗原修復(fù)液(1×)可以用于 10 個樣本的抗原修復(fù)。
使用方法 :
1. 對于石蠟切片:
a. 脫蠟:二甲苯 3 次,每次 3-5min→ 無水乙醇 2 次,每次 3-5min→ 95%乙醇 1 次,3-5min→ 90%乙醇 1次,3-5min→ 75%乙醇 1 次,3-5min→ 蒸餾水洗 2 次,每次 3-5min。
b. 抗原修復(fù):將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中,95-100℃加熱約 15 min (加熱時間可以控制在 10-20 min內(nèi),適宜的加熱時間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復(fù)液(1×)使用前需預(yù)熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。
隨后大約在 20-30 min 內(nèi)冷卻室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,每次 3-5 min。隨后即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。
2. 對于冰凍切片:
用免疫染色洗滌液洗滌切片 5 min。將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中,95-100℃加熱約 15 min (加熱時間可以控制在 10-20 min 內(nèi),適宜的加熱時間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復(fù)液(1×)使用前需預(yù)熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在 20-30 min 內(nèi)冷卻室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,每次 3-5 min。隨后即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。
3. 對于其它樣品的抗原修復(fù),可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進(jìn)行。
注意事項(xiàng) :
抗原修復(fù)過程可以使用索萊寶的的抗原修復(fù)盒進(jìn)行操作。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴手套操作。
北京索萊寶自產(chǎn) 免疫組化試劑 EDTA抗原修復(fù)液(1×)
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