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omega原裝 膠回收kit 100T/盒
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規格:100T/盒
商品貨號: | 商品品牌: | 規格 | 基本售價: | 選擇規格 |
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D2500-50T | Omega | 50T | 380.00元 |
E.Z.N.A® Gel Extraction Kit采用硅膠柱純化技術,適合從各種類型各種濃度的瓊脂糖凝膠中回收100bp-20kb的DNA片段,回收率可達到60-70%,可直接應用于酶促連接反應、PCR擴增、酶切以及標記等實驗。
此外,該試劑盒還可以用從于PCR產物,酶切產物中直接純化DNA。將目的DNA片段從瓊脂糖凝膠中切下,加入Binding Buffe水浴溶解凝膠,而后轉移HiBind®離心柱上離心結合DNA,經兩步簡單洗滌,終用Elution Buffer洗脫DNA。
快速--可以在15分鐘內完成純化工作
可靠--適的緩沖液保證DNA純度和高回收率
安全--無須接觸有害的有機物抽提
高質--純化的DNA適合于各種應用
片段大--可回收大于10kb的DNA片段
膠回收試劑盒操作步驟(omega)
1. 配制瓊脂糖EB凝膠,電泳以分離DNA片段。任何類型或等級的瓊脂糖都可以使用。
我們強烈的推薦使用新鮮的TAE/TBE電泳緩沖液。不要重復使用電泳緩沖液,舊的電泳緩沖液PH會增加而降低DNA的回收產量;
2. 電泳足夠時間后,在紫外燈下小心地把所需的DNA的片段切下來。并盡量去除多余的凝膠。
注意:DNA在紫外燈下的曝光的時間不要超過30秒,同時在紫外燈下操作的時候一定要戴保護眼鏡。
3. 稱取空離心管的重量,切下帶目的片段的凝膠裝在1.5ml離心管中并稱其重量,求出凝膠塊的重量,近似地確定其體積。一般情況下,凝膠的密度為1g/ml,于是凝膠的體積與重量的關系可按下面換算:凝膠薄片的重量為0.2g 則其體積為0.2ml;加入等倍凝膠體積的Binding Buffer,把混合物置于55℃~65℃水浴中溫浴7min凝膠*融化,其間每隔2-3分鐘混勻一次;
重要提醒:在凝膠*溶解之后,注意凝膠-Binding Buffer混合物的pH值。如果其pH值大于8的話,DNA的產量將大大減少。觀察混合物的顏色,如果是橙色或紅色,則要加入5μl 濃度為5 M,pH為5.2的醋酸鈉,以調低其pH值。經過這一調節,該混合物的顏色將恢復為正常的淺黃色。一般情況下,使用新鮮的電泳緩沖液,凝膠-Binding buffer混合物的PH值的不會升高;
4. 轉移700μl的DNA-瓊脂糖溶液到一個HiBindTM DNA柱子,并把柱子裝在一個干凈的2ml收集管內,室溫下,10,000×g離心1min,棄去液體。
一個HiBind DNA柱子多可容納700μl的溶液,如果DNA-瓊脂糖混合物的體積大于700μl,可先轉移700μl溶液柱子,離心完后,將余下的溶液繼續加上柱子上。但是每一個HiBindTM柱子多可以結合25~30μg DNA。如果預期產量較大,則把樣品分別加到合適數目的柱中。
5. 將柱子重新套回收集管中,加300μl Binding BufferHiBind DNA 柱子中;室溫下,10,000×g離心 1分鐘,去棄濾出液;這一步相當關鍵,不要忽略此步。
6. 將柱子重新套回收集管中,加入700μl SPW Wash bufferHiBind DNA柱子中,室溫下,10,000×g離心1分鐘,去棄濾出液;注:SPW Wash buffer在使用前必須按瓶子標鑒要求用無水乙醇進行稀釋。
7. 將柱子重新套回收集管中,重復加入700μl SPW Wash bufferHiBind DNA柱子中,室溫下,10,000×g離心1分鐘,去棄濾出液;
8. 棄去液體,將空柱子重新套回收集管中,10,000×g離心1min以甩干柱基質殘余的液體。
這步可以去除柱子基質上殘余的乙醇,不要省略此步―――對得到好的DNA產量是十分重要的。
9. 把柱子裝在一個干凈的1.5ml離心管上,加入30~50μl洗脫液或滅菌水上柱子膜上,10,000×g離心1分鐘,離心管中的溶液就是純化的DNA產物,保存于-20度。
如果再洗脫一次的話可以把殘余的DNA洗脫出來,不過那樣的濃度就會較低。
DNA的產量及質量:
把純化產物的樣品稀釋一定的倍數后,分別在260nm和280nm下測其光吸收值,回收得到的DNA的濃度可按以下公式來計算: DNA濃度=光吸收260×50×稀釋倍數μg/ml
長度大于500bp的片段通常能純化得到80%的產量。 而50bp~500bp的帶則可達到55%~80%的回收率。(光吸收260/光吸收280)的比率是核酸純度的一個標記。如果此值1.8,則意味著核酸的純度>90%。另一方面,如果純化產物的產量較低時,可以用瓊脂糖EB電泳估算產物的濃度。
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3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。
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運輸說明:
1、極低溫產品:極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產品:低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
3、常溫產品:常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。