目錄:北京索萊寶科技有限公司>>分子生物學>>DNA電泳>> G8142GoldView II型核酸染色劑(5000×)
貨號 :G8142 |
規格 :0.5ml (5000×) |
保存 :-20℃,短期 4℃保存。 |
注意 :本產品屬于微量核酸檢測試劑,使用時請嚴格按照說明書操作。*次使用前請融化后離心再開封。
GoldView II型核酸染色劑(5000×)產品簡介 :
GoldView II是一種可代替溴化乙錠 (EB) 的新型花青類核酸染料, 采用瓊脂糖電泳檢測DNA時, GoldView II 與核酸結合后能產生很強的熒光信號,其靈敏度比 EB 強 5-10 倍,使用方法與之*相同。GoldView II 與核酸結合后,大吸收峰為 497nm,另外,其在 254nm 處也有一強吸收峰,發射波長為 520nm,在紫外透射光下雙鏈 DNA 呈現綠色熒光,而且也可用于染 RNA。通過 Ames 試驗、小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗、小鼠睪丸精母細胞染色體畸變試驗,致突變性結果均為陰性;而溴化乙錠(EB)是一種強致癌劑。因此用 Goldview II 代替 EB 不失為一種明智的選擇。
GoldView II型核酸染色劑(5000×)使用方法:膠染:
由于 GoldView II 敏感度比 EB 高數倍,使用時,請將商品化的 Marker 用 1×DNA Loading Buffer 作 5-10倍的稀釋,上樣 1-10μl, 以得到較好的結果。而對于待檢測樣品,通常僅需 1-2μl 即可。如果濃度較高,也須作一倍數的稀釋,否則會造成條帶不整,影響遷移速率。凝膠回收請選擇點染方法。
1. 將 50ml 瓊脂糖凝膠溶液(濃度一般為 0.8%~2%)在微波爐中融化。
2. 冷卻不燙手時加入 10μl GoldView II,輕輕搖勻,避免產生氣泡。
3. 倒膠,待瓊脂糖凝膠*凝固后上樣電泳。
4. 電泳完畢在紫外燈下觀察。若使用數碼相機照像記錄,則關閉相機的閃光燈,放在自動檔即可;若使用凝膠成像系統照相,通過調節光圈、曝光時間,選擇合適的濾光片,可得到成像清晰的照片。
點染:
染色效果不如膠染方法,但成本更低,同時適用于凝膠回收。
1. 常規方法制備不含任何染料的瓊脂糖凝膠。
2. 用 1x Loading Buffer 將本產品稀釋 100-1000 倍,現用現配。
3. 取稀釋后的染料 5μl 與 1-2μl 樣本混勻后上樣即可(膠回收時可加入過量樣本)。
注意事項:
1. 膠厚度不宜超過 0.5cm,膠太厚會影響檢測的靈敏度。
2. 要想得到較好的實驗結果, 請將商品化的 Marker 用 1×DNA Loading Buffer 作一定的稀釋, 一般在 5-20倍左右稀釋后上樣 1-10μl,請自行摸索稀釋倍數。
3. 雖然未發現 GoldView II 有致癌作用,但其由 DMSO 溶解,對皮膚、眼睛會有一定的刺激,操作時應戴上手套。
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