目錄:北京索萊寶科技有限公司>>常用生化試劑>> E1171EDTA脫鈣液 (PH7.2)
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100ml |
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貨號 | E1171 |
摘要:EDTA脫鈣液的原理是螯合鈣離子,保存EDTA脫鈣液的方法是常溫保存,組織脫鈣實驗常用的EDTA脫鈣液的方法時間較長,同時對組織損傷也較小。常用的EDTA脫鈣液的PH值是7.2
一,EDTA脫鈣液 (PH7.2)包裝簡介:(附表)
貨號:E1171
規格:100ml/500ml
保存:常溫保存,有效期1年。
EDTA脫鈣液PH值 | PH7.2 |
貨號: | E1171 |
規格: | 100ml/500ml |
保存: | 常溫保存,有效期1年。 |
二,原理以及優缺點:
一些組織內含有骨質或鈣化物時,含鈣的組織不宜直接用石蠟包埋切片。這是因為鈣和石蠟之間的密度不同,較難切除完整的切片。對含鈣組織好固定之后,再進行脫鈣或二者同時進行。然后進行下游的實驗,如脫水、透明、浸蠟、包埋、切片。用于脫鈣的試劑很多,脫鈣劑包括有機酸、無機酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及電解法脫鈣。
EDTA 是一種相對較好的螯合脫鈣劑,對組織結構影響小,可以較好的保存組織的某些酶類,經EDTA脫鈣后的組織可以進行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太慢,一般脫需要數周數月。
Solarbio EDTA 脫鈣液優點:①經EDTA 脫鈣的組織染色結果好;②對組織的結構損害小;③用化學方法測試可以確定脫鈣的終點。
Solarbio EDTA 脫鈣液缺點:①脫鈣速度很慢,不適合常規標本脫鈣使用;②脫鈣后組織會稍微變硬。
三,操作步驟:
1,骨組織脫鈣時,取材不易過厚,一般大約5mm。
2,組織固定后,用PBS 清洗3 次,每次20min。
3,組織用蒸餾水洗清洗3 次,每次20min。
4,組織轉移20~30 倍體積的EDTA 脫鈣液中,脫鈣10~30 天或更長時間。如果想加快脫鈣速度,可以置于37℃進行脫鈣。如果必要,更換新的EDTA 脫鈣液繼續脫鈣,多數組織脫鈣2 周~3 個月即可,每周更換一次,直終點。亦可采用微波快速脫鈣法:微波爐設在200W左右的檔位,每次加熱5min,依據組織厚度和密度重復3~5min,中間間隔3~5min。
5,用蒸餾水沖洗數次。
6,常規脫水、包埋。
四,脫鈣實驗注意事項:
1,厚度5mm 的骨組織塊脫鈣時間一般脫鈣10~30 天即可。
2,適當加溫能加快脫鈣的速度,一般不應超過37~40℃,溫度過高容易使骨組織造成松散解體,尤其不可大于60℃。
3,脫鈣應*,防止脫鈣不足或過度。脫鈣程度應控制在不影響組織切片的同時盡量縮短脫鈣時間,以免脫鈣過長引起組織損害。
4,脫鈣用具避免使用金屬容器,盡量使用玻璃容器。
5,骨組織脫鈣應先固定后脫鈣或脫鈣固定同時進行,不應先脫鈣后固定,以便減少組織的損傷程度。
6,每隔一段時間檢測一次脫鈣程度,避免脫鈣過度,脫鈣過度會增加組織的損傷程度,影響染色結果。
7,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
五,脫鈣實驗中的一些小技巧:
脫鈣終點的測定(物理法):采用針刺、手掐、鉗夾等方法,當骨組織變軟或針刺時沒有阻力感即可終止脫鈣。物理檢測法會對組織結構有一定的損害, 盡量避免用力過大或反復檢測。
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