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乙酰輔酶A含量檢測試劑盒

產品內容：
試劑一：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 500µL 試劑五充分溶解備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
試劑三：液體 20µL×1 支，4℃保存。臨用前加入 500µL 試劑五充分溶解備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
試劑四：粉劑×1 瓶，-20℃保存。臨用前加入 45mL 試劑五充分溶解備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
試劑五：液體 60mL×1 瓶，4℃保存。
工作液的配制：臨用前請根據擬用工作液體積（樣本數×0.92 m L），將試劑二、三和四按照1:1:90的比例混合，或者直接把試劑二和試劑三加入到試劑四中混勻（可以測定48樣）；加樣前置37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）水浴鍋中預熱30 min；現配現用；

產品說明：
乙酰輔酶 A 廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中。是生物體能源物質代謝過程中產生的一種重要的中間代謝產物。在體內能源物質代謝中是一個樞紐性的物質。糖、脂肪、蛋白質三大營養物質通過乙酰輔酶 A 匯聚成一條共同的代謝通路-三羧酸循環和氧化磷酸化，經過這條通路*氧化生成二氧化碳和水，釋放能量用于 ATP 合成。此外，乙酰輔酶 A 是合成脂肪酸，酮體，膽固醇及其衍生物等生理活性物質的前體物質。
蘋果酸脫氫酶可催化蘋果酸和 NAD 生成草酰乙酸和 NADH。檸檬酸合酶可催化乙酰輔酶 A 和草酰乙酸生成檸檬酸和輔酶 A。利用蘋果酸脫氫酶和檸檬酸合酶的偶聯反應，乙酰輔酶 A 含量和NADH 的生成速率成正比，340nm 下吸光值的上升速率反應了乙酰輔酶 A 含量的高低。

需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

測定意義：乙酰輔酶A 廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中。是生物體能源物質代謝過程中產生的一種重要的中間代謝產物。在體內能源物質代謝中是一個樞紐性的物質。糖、脂肪、蛋白質三大營養物質通過乙酰輔酶A 匯聚成一條共同的代謝通路-三羧酸循環和氧化磷酸化，經過這條通路*氧化生成二氧化碳和水，釋放能量用于ATP 合成。此外，乙酰輔酶A 是合成脂肪酸，酮體，膽固醇及其衍生物等生理活性物質的前體物質。
測定原理：蘋果酸脫氫酶可催化蘋果酸和NAD 生成草酰乙酸和NADH。檸檬酸合酶可催化乙酰輔酶A和草酰乙酸生成檸檬酸和輔酶A。利用蘋果酸脫氫酶和檸檬酸合酶的偶聯反應，乙酰輔酶A含量和NADH 的生成速率成正比，340nm 下吸光值的上升速率反應了乙酰輔酶A 含量的高低。
需自備的儀器和用品：紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

相關文獻：

《Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis》 作者:Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou, Shuiqing Liu, Maojia Zhao, Yilu Qin, Rui Chen, Yong Teng & Manran Liu 期刊:Cell Death and Disease 影響因子:5.959 PMID:30850587
《Cancer-Associated Fibroblasts Accelerate Malignant Progression of Non-Small Cell Lung Cancer via Connexin 43-Formed Unidirectional Gap Junctional Intercellular Communication》 作者:Luo M,Luo Y, Mao N, Huang G, Teng C,Wang H, Wu J, Liao X, Yang J 期刊:Cellular Physiology and Biochemistry 影響因子: PMID:30453281
 

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