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產(chǎn)品名稱:Beyotime 活性氧檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號: S0033S
英文名稱:Reactive Oxygen Species Assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格:>100次
產(chǎn)品介紹:
活性氧檢測試劑盒(Reactive Oxygen Species Assay Kit,也稱ROS Assay Kit)是一種利用熒光探針DCFH-DA進行活性氧檢測的試劑盒。DCFH-DA本身沒有熒光,可以自由穿過細胞膜,進入細胞內(nèi)后,可以被細胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細胞膜,從而使探針很容易被裝載到細胞內(nèi)。細胞內(nèi)的活性氧可以氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF。檢測DCF的熒光就可以知道細胞內(nèi)活性氧的水平。
本試劑盒提供了活性氧陽性對照試劑Rosup,以便于活性氧的檢測。Rosup是一種混合物(compound mixture),濃度為50mg/ml。
本試劑盒本底低,靈敏度高,線性范圍寬,使用方便。
本試劑盒S0033S包裝可以測定100-500個樣品,S0033M包裝可以測定500-2500個樣品。
產(chǎn)品使用說明:
1. 裝載探針
對于刺激時間較短(通常為2小時以內(nèi))的細胞,先裝載探針,后用活性氧陽性對照或自己感興趣的藥物刺激細胞。對于細胞刺激時間較長(通常為6小時以上)的細胞,先用活性氧陽性對照或自己感興趣的藥物刺激細胞,后裝載探針。
原位裝載探針:本方法僅適用于貼壁培養(yǎng)細胞。按照1:1000用無血清培養(yǎng)液稀釋DCFH-DA,使終濃度為10微摩爾/升。去除細胞培養(yǎng)液,加入適當(dāng)體積稀釋好的DCFH-DA。加入的體積以能充分蓋住細胞為宜,通常對于六孔板的一個孔加入稀釋好的DCFH-DA不少于1毫升。37℃細胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育20分鐘。用無血清細胞培養(yǎng)液洗滌細胞三次,以充分去除未進入細胞內(nèi)的DCFH-DA。通常活性氧陽性對照在刺激細胞20-30分鐘后可以顯著提高活性氧水平。
收集細胞后裝載探針:按照1:1000用無血清培養(yǎng)液稀釋DCFH-DA,使終濃度為10微摩爾/升。細胞收集后懸浮于稀釋好的DCFH-DA中,細胞濃度為一百萬至二千萬/毫升,37℃細胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育20分鐘。每隔3-5分鐘顛倒混勻一下,使探針和細胞充分接觸。用無血清細胞培養(yǎng)液洗滌細胞三次,以充分去除未進入細胞內(nèi)的DCFH-DA。直接用活性氧陽性對照或自己感興趣的藥物刺激細胞,或把細胞等分成若干份后刺激細胞。通常活性氧陽性對照在刺激細胞20-30分鐘后可以顯著提高活性氧水平。
說明:僅在陽性對照孔中加入Rosup作為陽性對照,其余孔不必加入Rosup。
2. 檢測
對于原位裝載探針的樣品可以用激光共聚焦顯微鏡直接觀察,或收集細胞后用熒光分光光度計、熒光酶標(biāo)儀或流式細胞儀檢測。對于收集細胞后裝載探針的樣品可以用熒光分光光度計、熒光酶標(biāo)儀或流式細胞儀檢測,用激光共聚焦顯微鏡直接觀察也可以。
3. 參數(shù)設(shè)置
使用488nm激發(fā)波長,525nm發(fā)射波長,實時或逐時間點檢測刺激前后熒光的強弱。DCF的熒光光譜和FITC非常相似,可以用FITC的參數(shù)設(shè)置檢測DCF。
產(chǎn)品組分:
S0033S-1DCFH-DA(10mM)0.1ml
S0033S-2活性氧陽性對照(Rosup, 50mg/ml)1ml
說明書1份
儲存與運輸:
-20℃保存,一年有效。
產(chǎn)品訂購信息:
品牌 貨號 名稱 規(guī)格
Beyotime P0131-5ml 抗熒光淬滅封片液(含DAPI)5ml 5ml
Beyotime P0131-25ml 抗熒光淬滅封片液(含DAPI)25ml 25ml
產(chǎn)品名稱:Beyotime 活性氧檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號: S0033S
關(guān)于公司:
Beyotime創(chuàng)辦于2001年。近20年來專注于自主研發(fā)和生產(chǎn)。2007年成立上海碧云天生物技術(shù)有限公司,為 特新“小巨人"企業(yè),并進一步入選第二批第一年建議支持的專精特新“小巨人"企業(yè), 也是G60科創(chuàng)走廊一類重點扶持企業(yè)和上海市專精特新中小企業(yè)。江蘇碧云天為江蘇省優(yōu)良企業(yè),南通市雙創(chuàng)優(yōu)企。公司主要研發(fā)生產(chǎn)生物、醫(yī)學(xué)研究用試劑、試劑盒、消耗品和儀器設(shè)備。
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上海華雅思創(chuàng)生物科技有限公司是一家為生命科學(xué)領(lǐng)域內(nèi)的科學(xué)研究、細胞治療和生物制藥相關(guān)人員提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)的生物高科技公司,公司主辦的干細胞搜網(wǎng)(w w w.stemcell.so)為中國干細胞領(lǐng)域大資源庫,網(wǎng)站提供:干細胞治療產(chǎn)品、細胞培養(yǎng)試劑耗材、臍帶MSC間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基、IPS細胞ES胚胎干細胞培養(yǎng)基、DC細胞淋巴細胞無血清培養(yǎng)基、R&D細胞因子等種類豐富的產(chǎn)品;涉及StemCell、HY StemCell、StemRD、CellGenix、PeproTech、Corning、Thermo、Gibco、 PALL、LONZA、BD等國際公司品牌和生產(chǎn)廠家。以“Yes Service"核心服務(wù)理念,緊緊圍繞“Yes Service focus on Biology 越服務(wù) 專注生物"打造中華民族全新服務(wù)體系,我們與客戶攜手一起探索生命科學(xué)奧秘,解決人類健康問題,發(fā)展綠色環(huán)保生態(tài),推動世界和諧持續(xù)發(fā)展。
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